拳参正丁醇提取物对豚鼠心肌生理特性的影响药学论文.doc

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拳参正丁醇提取物对豚鼠心肌生理特性的影响_药学论文作者：黄志华,钟富有李良东朱丹叶和杨曾靖【摘要】目的研究拳参正丁醇提取物对豚鼠离体右心房自律性及收缩特性的影响，并探讨其作用机制。方法采用豚鼠离体右心房测定拳参正丁醇提取物对其自律性、收缩幅度、收缩速度、舒张速度的影响。结果拳参正丁醇提取物可降低豚鼠离体右心房的自律性，降低豚鼠离体右心房的收缩幅度、收缩速度、舒张速度，且具有明显的剂量依赖性。结论拳参正丁醇提取物可抑制豚鼠离体右心房的自律性，降低豚鼠离体右心房的收缩幅度、收缩速度、舒张速度，且具有明显的剂量依赖性。其机制可能与抑制钙离子的内流及改变肌浆网上的钙泵活性有关。【关键词】拳参正丁醇提取物右心房自律性收缩特性Abstract:ObjectiveTo investigate the effect of Polygonum Bistorla L.n-Butyl alcohol extract on autorhythmicity and contraction of isolated right atrium of guinea pig and its mechanism.MethodsAfter treated with Polygonum bistorla L.n-Butyl Alcohol Extract,the isolated right atria were investigated that including autorhythmicity,contraction scale,contraction velocity and relaxation speed.ResultsThe autorhythmicity of the isolated right atria were inhibited after treated with the extract.Moreover,their contraction scale,contraction velocity and relaxation speed were significantly reduced in a dose-dependent manner.ConclusionPolygonum bistorla L.n-Butyl Alcohol Extract can inhibit autorhythmicity of the isolated right atrium,and significantly reduce their contraction scale,contraction velocity and relaxation speed in a dose-dependent manner.Its mechanism may be related to inhibition of calcium influx and mediation activity of calcium pump in sarcoplasmic reticulum.Key words:Polygonum Bistorla L.n-Butyl Alcohol Extract;Right atrium;Autorhythmicity;Contraction拳参Polygonum bistora L.别名草河车，系蓼科植物的干燥根茎。具有清热、镇惊、利湿、消肿、镇痛等功效。主要成分［1］为没食子酸、丁二酸、槲皮素、槲皮素-5-O-β-D-葡萄糖苷、原儿茶酸等。其中槲皮素的药理作用研究较多，具有抗癌［2,3］、止泻［4,5］、抑制血小板聚集［6］、心肌保护、抗氧自由基［7～11］等作用。本课题组曾报道其水提取液具有抗心律失常［12］及镇痛作用［13］，其正丁醇提取物(Polygonum Bistorla L.n-Butyl Alcohol Extract)具有中枢抑制［14］、镇痛［15］、心肌缺血［16］及心肌缺血再灌注损伤的保护［17］等作用。现报道其正丁醇提取物对豚鼠离体右心房自律性及收缩特性的影响。1器材1.1药物拳参正丁醇提取物Polygonum bistorla L.n-Butyl Alcohol Extract）由沈阳药科大学中医药学院植化教研室提供，实验前用双蒸水稀释至所需浓度。1.2动物豚鼠购自赣南制药厂实验动物中心，体重300～400 g，雌雄各半。1.3仪器HHS1-2电热恒温水浴锅（上海跃进医疗器械厂）；JZ100型10 g张力换能器（北京新航兴业科贸有限公司）；Medlab-U/4CS生物信号采集处理系统（南京美易科技有限公司）。2方法与结果2.1方法健康豚鼠，雌雄各半，体重300～400 g，击头剖心，在持续充纯氧的条件下，分离右心房。将右心房悬挂在含20 ml Krebs液的麦氏浴槽中，Krebs液的成分（mmol·L-1）如下：NaCl 120.00，CaCl2 2.20，KCl 5.40，MgCl2 1.0，NaHCO3 25.00，Glucose 5.6，pH 7.2～7.4，持续通入纯氧，恒温(37±0.5)℃。右心房稳定45 min后，测定其正常自动节律、收缩幅度、收缩速度和舒张速度作为给药前对照，然后累积加入拳参正丁醇提取物（0.001×3，0.01，0.01×3，0.1，0.1×3，1，1×3，10，10×3 mg·L-1）0.2 ml，每次给药间隔5 min，测定其自动节律、收缩幅度、收缩速度、舒张速度的变化［18］。统计学分析：实验数据采用Graphpad prism4.0软件进行单因素方差分析，结果以柱状图表示，P＜0.05认为有统计学意义。2.2结果2.2.1拳参正丁醇提取物对右心房自动节律的影响拳参正丁醇提取物对自动节律的影响结果以右心房自动节律比表示，右心房自动节律比=给药后自动节律/实验前自动节律。结果见图1。结果表明，终浓度为10，10×3μg·L-1的拳参正丁醇提取物能抑制右心房自动节律。2.2.2拳参正丁醇提取物对右心房收缩幅度的影响拳参正丁醇提取物对右心房收缩幅度的影响以收缩比表示（收缩比=给药后收缩幅度/给药前收缩幅度），结果见图2。结果表明，拳参正丁醇提取物（0.1，0.1×3，1，1×3，10，10×3，100，100×3μg·L-1）具有抑制右心房收缩幅度的作用，且呈明显的剂量依赖性负性作用。2.2.3拳参正丁醇提取物对右心房收缩速度的影响拳参正丁醇提取物对右心房收缩速度的影响以收缩速度比表示（收缩速度比=给药后收缩速度/给药前收缩速度）。结果见图3。结果表明，拳参正丁醇提取物（0.01，0.01×3，0.1，0.1×3，1，1×3，10，10×3 mg·L-1）具有抑制右心房收缩速度的作用，且呈明显的剂量依赖性负性作用。2.2.4拳参正丁醇提取物对右心房舒张速度的影响拳参正丁醇提取物对右心房舒张速度的影响以舒张速度比表示（舒张速度比=给药后舒张速度/给药前舒张速度）。结果见图4。结果表明，拳参正丁醇提取物（0.01，0.01×3，0.1，0.1×3，1，1×3，10，10×3mg·L-1）具有抑制右心房舒张速度的作用，且呈明显的剂量依赖性负性作用。3讨论本实验结果表明，10μg·L-1及10×3μg·L-1剂量的拳参正丁醇提取物对豚鼠离体右心房肌具有负性频率作用，但无剂量依赖性，而是有剂量选择性。拳参正丁醇提取物溶解部分主要由4种成分组成［19］，包括丁香苷(syringin)、儿茶素(catechin)、芦丁(rutin)、mururin A，不同的成分可能对心率的影响不同，在浓度为1 mg·L-1及1×3 mg·L-1时，复合物的作用对心率有抑制作用，但其作用较弱。0.1×3，1，1×3，10，10×3，100及100×3μg·L-1剂量的拳参正丁醇提取物可使右心房肌的收缩幅度、收缩速度、舒张速度均降低，且具有剂量依赖性。有文献报道表明，儿茶素能拮抗氯仿、CaCl2和哇巴因所致的室性心律失常，其抗心律失常作用可能与抑制钙离子的内流和胞浆内钙离子的超负荷或直接阻断钙通道而起作用［20］。拳参正丁醇提取物对心房肌收缩幅度和收缩速度的抑制作用也可能与抑制钙离子的内流，降低细胞内钙离子的浓度，从而使心房肌的收缩力度和速度均降低；其对心房肌舒张速度的抑制作用可能与改变肌浆网上的钙泵活性有关，这有待于进一步深入的研究。【参考文献】［1］刘晓秋，陈发奎，吴立军，等．拳参的化学成分［J］.沈阳药科大学学报，2004，21(3)：187.［2］余生元，董晓强，黄世良，等．槲皮素对胃癌细胞多药耐药的逆转作用［J］.江苏医药，2004，30(7)：510.［3］朱蕾，何丽娅．槲皮素抗癌作用的分子机制［J］.武汉科技大学学报·自然科学版，2004，27(2)：194.［4］吴荷芬，张琳，何露，等．拳参辅助治疗婴幼儿腹泻的临床分析［J］.右江医学，2003，31(4)：389.［5］戚懋材，熊惠江．拳参治疗婴幼儿秋冬季腹泻28例［J］.中华实用医学，2002，4(6)：48.［6］臧宝霞，金鸣，吴伟，等．槲皮素抑制血小板活化因子受体结合作用的研究［J］.心肺血管病杂志，2004，23(2)：105.［7］唐玉，成亮，高建，等．槲皮素对急性心肌梗死大鼠模型白细胞黏附分子表达的影响［J］.中国老年学杂志，2005，25(1)：80.［8］季凤清，李宝红，孙海梅，等．槲皮素对急性心肌缺血大鼠心肌caspase-3基因蛋白表达的影响［J］.首都医科大学学报，2004，25(4)：435.［9］马维勇，陆仁英，许帆，等．复方板蓝根颗粒治疗病毒性心肌炎的疗效观察［J］.实用心脑肺血管病杂志，2003，l1(3)：l35.［10］王晓庆，梁中琴，顾振纶，等．槲皮素抑制血管生成作用的实验研究［J］.中国药理学通报，2004，20(10)：1161.［11］曹文军，陈瑞芬，刘国贞，等．槲皮素对缺血再灌注大鼠心肌损伤的保护作用［J］.首都医科大学学报，2004，25(3)：311.［12］Zeng Jing，Huang Xian-hua，Lai Fei，et a1．Antiarrhythmic Efects of PolygoauraBistorta L．Agueous extract［J］.Drug Development Research，2002，55(4)：264.［13］曾靖，单热爱，钟声，等．拳参水提取物镇痛作用的实验观察［J］.中国临床康复，2005，9(6)：80.［14］曾靖，黄志华，叶和杨，等．拳参正丁醇提取物中枢抑制作用的研究［J］.赣南医学院学报，2003，23(4)：359.［15］黄玉珊，曾靖，叶和杨，等．拳参正丁醇提取物的镇痛作用的研究［J］.赣南医学院学报，2004，24(1)：12.［16］叶和杨，汪秀荣，黄志华，等．拳参正丁醇提取物对心肌缺血的影响［J］.时珍国医国药，2006，17(6)：907.［17］叶和杨，黄志华，汪秀荣，等．拳参正丁醇提取物保护大鼠心肌缺血再灌注损伤的剂量依赖性效应［J］.中国临床康复，2005，9(39)：118.［18］叶和杨，黄志华，邱峰，等．夜来香正丁醇提取物对离体豚鼠右心房收缩特性的影响［J］.中国临床康复，2006，10(15):99.［19］刘晓秋，李维维，生可心，等．拳参正丁醇提取物的化学成分［J］.沈阳药科大学学报，2006，23(1)：17.［20］黄志明，梁钢，黄仁彬，等．儿茶素对心律失常的作用［J］.广西中医药，2000，23(2)：113.