脂肪肝肝脂与血脂的相关性临床医学论文.doc

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脂肪肝肝脂与血脂的相关性_临床医学论文作者：樊希承，黄颖，黄亦琦，杨辉【关键词】］,血脂；肝脂；非酒精性脂肪肝［摘要］目的：探讨非酒精性脂肪肝的发病机制，分析肝脂与血脂的相关性。对几种生化和免疫测定脂质的检验方法进行分析比较，评价和筛选有效的检验方法，使血液检测分析成为脂肪肝诊断的重要指标，并为脂肪肝研究和抗脂肪肝药物开发提供依据。方法：建立大鼠非酒精性脂肪肝模型后，采血后处死大鼠，摘取肝脏。观察肝组织病理的同时检验血脂和肝脏脂肪的多项生化指标。对几种生化和免疫测定脂质的方法进行分析比较。结果：模型组与正常组比较的大鼠肝脏细胞发生脂肪变性。大鼠血脂和肝组织中检测的TG、TC、HDLC、ALT、AST、GGT有不同程度增高(P<0.01)，其中TG含量明显升高(P<0.001)，与光镜下观察结果一致。肝脏细胞发生脂肪变性的同时肝脏脂质、血脂和肝功能酶类升高，血脂与肝脂的变化呈正相关，肝功能酶类变化也呈正相关。结论：高脂饮食饲养大鼠血脂和肝脂含量可不同程度地增高，具备人类脂肪肝特征，符合人类脂肪肝的演变过程。肝脂、血脂含量分析是非酒精性脂肪肝研究的关键性指标，对脂肪肝明确诊断有特殊意义。［关键词］血脂；肝脂；非酒精性脂肪肝Study of the Relativity between Blood Lipidand Liver Fat of NAFL Rats Abstract：Objective Discuss the mechanism of non alcoholic fatty liver(NAFL)，study the relativity between the liver fat and the blood lipid.Compare the several methods of biochemistry and immunology.Filter and estimate the most valid method.Try to use the blood test as an important target to diagnosis and treat NAFL，meanwhile provide the vidence of the research of the NAFL and antiNAFL drugs.Methods Raising the rats with high lipid food to form the rat fatty liver model.When it was finished，we killed some rats and got the liver tissue.Observe the multiple biochemistry determining targets of liver fat and the pathology changes in the liver tissue.Compare the several methods of biochemistry and immunology.Filter and estimate the most valid method.Results The model groups had the liver cell fat denaturalization compared with the normal groups.The biochemistry determining targets(TG、TC、HDLC、ALT、AST、GGT)had increased in various degree(P<0.01)，especially in TG(P<0.001).At the same time of the fat denaturalization，the liver lipid，blood lipid and the liver function enzymes increased.The change of blood lipid was positive with the change of liver fat and liver function enzymes.Conclusion Raising the rats with high lipid food can cause the liver cell fat denaturalization in various degrees.It can make a perfectanimal model of the fatty liver possessing the human development character.Blood lipid and liver fatarekey targets of alcoholic fatty liver to make a clear diagnosis.Key words:Blood lipid；Liver fat；Non alcoholic fatty liver(NAFL)非酒精性脂肪肝(non alcoholic fatty liver NAFL)是指脂肪在肝细胞中过度蓄积的临床病理综合征。发病机制至今尚未完全明确，以肝组织中蓄积大量脂肪(大多是甘油三酯)，肝细胞发生显著脂肪变性和临床上出现血脂变化为特点，用临床常用检验方法分析肝脏脂质与血脂的相互关系国内至今尚未见报道。现将本研究实验结果报道如下。1材料和方法1.1材料取材基本路线流程：SD大鼠分为正常组28只和模型组36只，正常组喂基础饲料、模型组喂高脂饲料(基础饲料加猪油10%，胆固醇1%、胆盐0.3%)建立非酒精性高脂血症脂肪肝模型。7周后眼框后静脉丛取血、肝素抗凝，离心分离出血浆，后用颈椎脱臼法处死大鼠，摘取肝脏，固定部位取部分组织，分别加生理盐水制成10%的肝组织匀浆，用生化、免疫方法进行同步分析，测定大鼠肝脂与血脂的各种指标。另取部分肝组织制作常规病理切片，光镜下进行观察各组大鼠肝细胞病理学脂肪变性。1.2方法血浆直接测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG);高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、载脂蛋白(Apo)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬酸氨基转移酶(AST)的r谷氨酰转肽酶(GGT)含量变化。肝脂测定用10%的肝组织匀浆，离心2 500转/min，离心10min后，取上清液测肝脏总胆固醇(LTCH)、肝脏甘油三酯(LTG)、肝脏高密度脂蛋白胆固醇(LHDLC)，肝脏载脂蛋白(LApoA、LApoB)和肝功能酶类。血浆和肝脏匀浆脂质采用血脂测定试剂盒，其中TCH、TG、HDLC含量的测定方法为酶法。ApoA、ApoB测定用免疫透射测定比浊法。仪器用美国BECKMAN全自动生化分析仪，试剂美国BECKMAN公司的提供。实验期间检验质量控制：每次实验前仪器、试剂均通过严格的定标、并通过临床检验中心质控认可。1.3统计方法采用SPSS 10.0统计软件进行检验分析。两样本均数的比较用t检验，多组均数的比较用方差分析。2结果与正常组比较，脂肪肝模型组的大鼠肝脏细胞发生脂肪变性，肝脂与血脂有不同程度升高，光镜下观察病理变化与检验结果相吻合。见表1。表1大鼠肝脂、血脂和肝功能酶类指标改变（略）注：正常组与模型组对照进行组间t检验*P<0.01**P<0.001。实验证实大鼠经高脂饮食喂养表现为非酒精性高脂血症脂肪肝。肝脏细胞脂肪变性同时肝脂含量升高，肝脂含量升高，血脂含量也升高，大鼠血脂和肝功能酶类TG、TC、HDLC、ALT、AST、GGT有不同程度增高(P<0.01)，其中TG含量明显升高(P<0.001)。3讨论3.1高脂饮食饲养大鼠可导致肝细胞的脂肪变性肝脏脂质、血脂、肝功能酶活性呈升高趋势，为理想的脂肪肝动物模型，具备人类脂肪肝特征，本实验研究有足够的说服力，证实血液检验对非酒精性高脂血症脂肪肝的诊断有一定优势。3.2脂肪肝脂肪肝的发病机制是脂质代谢紊乱，TG大量堆积于肝脏所致的一种病理改变。各种原因所致的脂肪肝均使脂质升高。动物模型的实验研究已证实，病理分析显示，肝细胞出现细胞内脂滴。脂肪变性肝细胞数从0%～5%上升到25%～50%表明本次模型成功。表1示肝脏中肝脂和血脂密切的相关性，肝功能酶类ALT、AST、GGT的增高说明肝脏细胞受损。3.3脂肪肝的形成大量进食高脂肪、高胆固醇饮食，外源性脂肪大量增加，小肠吸收后进入血液中的乳糜微粒增加，肝脏摄取增多，当肝脏合成三酯酰甘油的量大于肝细胞转运能力时，三酯酰甘油则在肝内沉积，形成脂肪肝。3.4方法分析本结果使用肝脏匀浆，测定单位为mmol/L比g/L更为客观。脂肪肝中肝脂是诊断脂肪肝的关键性指标，实验中ApoA、ApoB均无明显变化，因载脂蛋白用免疫透射比浊测定。Apo应用人血清Apo与试剂中特异性抗人Apo抗体相结合形成不溶性免疫复合物，动物实验结果特异性则不显著。提示应用动物专用免疫试剂盒(如大鼠放射免疫试剂盒)或其他方法测定(如高效液相色谱法)。3.5诊断临床确诊脂肪肝的金标准用肝穿活检，不易被患者接受，而血脂检验简便无创，较高特异性，诊断率高，可避免不必要的有创性的肝穿。本研究表明，脂肪肝的血脂含量与肝脂及脂肪肝关系密切，因此根据血脂含量的分析，可以对脂肪肝做出较为明确的诊断。参考文献：［1］黄芳，阴斌霞，展淑芹.脂肪肝与血脂和转氨酶关系的调查研究［J］.实用医技杂志2005.12(5)：12511252.［2］吕瑞娟，等.脂肪肝的发病机制和治疗研究进展［J］.甘肃科学学报，2001，13(2):57 64.［3］孙要武.大鼠脂肪肝实验模型的建立［J］.哈尔医学院学，2005，2(4)：361362.［4］时艳，许惠琴脂肝灵对实验性大鼠脂肪肝的作用研究［J］.中药药理与临床，2005，21(6)：7779.［5］董春富，吴国华脂肪肝患者血脂、肝功能指标改变的分析［J］.检验医学，2005，20(2)：160161.［6］王济生.156例脂肪肝的病因学及血脂相关分析［J］.实用医技杂志，2004，11(11)：2294.［7］孙大裕.脂肪肝动物模型的研究进展［J］.中华消化杂志，2002，22(5)：305306.