原发性肝癌与血清同型半胱氨酸的相关性研究原发性肝癌是临床常见的消化道恶性肿瘤之一,是我国第4位常见恶性肿瘤,在肿瘤致死病因中位于第2位,严重威胁国人的生命和健康[1]。PHC早期临床表现无特异性,多数患者确诊时已为中晚期,甲胎蛋白是临床PHC诊断和治疗效果监测的重要指标,但AFP不能反应PHC的严重程度,且存在血清AFP阴性患者[2]。近年来,PHC的“液体活检”取得较多进展[3,4],相较于AFP具有更高的灵敏度和特异度,但因检测技术要求高,临床无法广泛开展。因此更加灵敏的监测指标对PHC的早期诊断和病情评估具有重要意义。同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)是蛋氨酸在细胞内去甲基后形成的产物,同时也是一种稳定性较好的生物标记物。近年来,大量研究发现,高Hcy血症可使肿瘤发生的风险增大[5,6]。本研究通过对PHC患者Hcy水平的检测,探讨其与PHC的临床分期、肝功能Child-Pugh分级的关系,现报道如下。1、资料与方法1.1临床资料选取2018年6月—2019年12月在我院住院的PHC患者115例作为PHC组,其中男性97例,女性18例;年龄30～73岁,平均年龄(59.46±8.37)岁。纳入标准:①PHC患者的诊断、临床分期、肝功能Child-Pugh分级依据原发性肝癌诊疗规范(2019年版)[1];②临床分期为Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期;③肝功能分级为A级、B级、C级;④年龄<80岁,性别不限。排除标准:①合并严重免疫系统疾病、感染性疾病者;②有高血压、冠心病、糖尿病病史;③近期口服可能影响Hcy水平的药物如叶酸、B族维生素等。选取同期在我院体检正常的69例合肥物质科学研究院职工作为对照组,其中男性59例,女性10例;年龄24～69岁,平均年龄(56.25±8.54)岁。所有研究对象及家属均知情同意,本研究经中国科学院合肥肿瘤医院伦理委员会批准通过。1.2研究方法采用真空采血管采集所有研究对象空腹血5mL,转速为3000r/min(1199×g)离心15min,留取血清待检测。采用酶循环法全自动生化分析仪(美国BeckmanAU5800)测定血清Hcy及肝肾功能,血糖、血脂生化指标,试剂盒购自北京九强生物技术有限公司;采用化学发光法以电化学发光仪(美国BeckmanDXI800)测定血清AFP、癌胚抗原(carcinoembryonicantigen,CEA)、糖类抗原19-9(carbohydrateantigen19-9,CA19-9)、糖类抗原125(carbohydrateantigen125,CA125)、糖类抗原72-4(carbohydrateantigen72-4,CA72-4),试剂盒购自Beckman公司。1.3统计学方法使用SPSS19.0统计学软件对数据进行分析。符合正态分布的计量资料以x¯±s表示,2组间比较采用成组t检验,多组间比较采用单因素方差分析;不符合正态分布的计量资料以M(P25,P75)表示,组间比较采用Kruskal-WallisH检验;血清Hcy、肿瘤标志物水平与PHC临床分期、肝功能Child-Pugh分级的相关性分析采用Spearman相关分析;采用二元logistic回归分析探究PHC发生的危险因素。P<0.05为差异有统计学意义。2、结果2.12组生化检查指标比较对照组与PHC组患者间血尿素氮(bloodureanitrogen,BUN)、肌酐(creatinine,Cr)、总胆固醇(totalcholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白(highdensitylipoprotein,HDL)、低密度脂蛋白(lowdensitylipoprotein,LDL)、葡萄糖(glucose,GLU)比较差异无统计学意义(均P>0.05);谷丙转氨酶(alanineaminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartateaminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,AKP)、谷氨酰转肽酶(glutamyltranspeptidase,GGT)、胱抑素C(cystatinC,Cys)在组间比较差异有统计学意义(均P<0.05),见表1。表12组研究对象生化检查指标比较[M(P25,P75)]2.2对照组与PHC组及不同临床分期、肝功能分级组间Hcy、肿瘤标志物比较对照组血清Hcy值为10.20(7.70,11.89)μmol/L,PHC组患者组血清Hcy值为13.56(10.68,17.96)μmol/L,二者比较差异具有统计学意义(Hc=36.901,P<0.001)。2组间肿瘤标志物差异无统计学意义(均P>0.05)。PHC组患者中Hcy、CEA、CA19-9、CA125、CA72-4水平在不同临床分期组间、不同肝功能Child-Pugh分级组间比较,差异有统计学意义(均P<0.05);AFP水平在不同临床分期组间、不同肝功能Child-Pugh分级组间差异无统计学意义(均P>0.05),见表2。2.3PHC患者血清Hcy、肿瘤标志物水平与临床分期、肝功能分级的相关性分析PHC患者血清Hcy、CEA、CA19-9、CA125、CA72-4水平与临床分期呈正相关(r=0.585、0.232、0.421、0.385、0.349,均P<0.05),与肝功能Child-Pugh分级呈正相关(r=0.625、0.264、0.438、0.363、0.413,均P<0.05);AFP水平与临床分期(r=0.123)、肝功能Child-Pugh分级(r=0.146)无相关性(均P>0.05)。2.4血清Hcy与PHC的logistic回归分析在校正了年龄、性别、肿瘤标志物(AFP、CEA、CA19-9、CA125、CA72-4)后,采用二元logistic回归分析探究血清Hcy与PHC的相关性,发现血清Hcy仍是PHC患者的独立危险因素(OR=1.409,P=0.003),见表3。表2对照组与PHC组患者及不同临床分期、肝功能分级组间Hcy、肿瘤标志物比较[M(P25,P75)]表3血清Hcy与PHC的logistic回归分析3、讨论Hcy是一种具有一定细胞杀伤性的含巯基氨基酸,体内不能合成,是由蛋氨酸去甲基后形成的重要中间产物。MCCULLY于1969年首次提出高Hcy血症可能是心血管疾病的危险因素,Hcy作为冠心病、动脉粥样硬化等心脑血管疾病发生和发展的重要危险因素之一已被认同[7,8]。此外,近来越来越多的研究报道,高Hcy血症可使肿瘤的患病风险增加,是肿瘤发生的独立危险因素[9,10]。PHC在世界癌症死亡病因中居第2位,近年在我国的死亡率一直居高不下,因此对PHC的危险因素研究极其重要。近年来研究发现Hcy可作为肿瘤标志物用于消化道肿瘤的诊断[11],而肝脏是Hcy代谢的主要场所,因此研究PHC患者体内Hcy水平具有一定的临床意义。本研究发现,PHC患者血清Hcy水平较正常对照组明显升高(P<0.05),这与既往报道的研究结果相吻合[12,13],肝脏与Hcy的代谢过程相关。肝脏具有非常强的代偿能力,理论上轻度的肝损伤对Hcy代谢影响较小,只有肝脏出现较严重的实质性损伤时影响了Hcy的代谢才会出现高Hcy血症。而高Hcy血症是一种氧化应激指标,会对肝细胞造成氧化损伤,并进一步导致细胞凋亡和变性,从而诱发癌变[14,15]。通过分析本研究发现,PHC患者的血清Hcy水平与临床分期、肝功能Child-Pugh分级均呈正相关,血清Hcy水平越高提示PHC患者临床分期较晚,肝功能损伤程度较重,也进一步说明了上述观点。高Hcy血症增加患者罹患肿瘤的风险,目前研究[16]认为主要原因是叶酸和维生素B12的不足。Hcy的代谢需要在叶酸和维生素B12等辅酶的作用下,通过转硫化以及甲基化途径进行代谢。叶酸不足会导致机体内N5-甲基四氢叶酸合成不足,从而导致蛋氨酸循环发生异常,Hcy代谢的一个主要途径就是蛋氨酸循环,因此可使Hcy水平升高。另一方面,叶酸不足还会引起DNA异常甲基化,导致DNA的合成和修复异常,破坏基因的稳定性,影响肿瘤抑癌基因的表达,从而导致肿瘤细胞的产生及增殖。将PHC可能危险因素及Hcy进行logistic回归分析,通过校正年龄、性别及其他肿瘤标志物本研究还发现Hcy是PHC患者的独立危险因素。对于PHC患者,发病前期往往都存在胃肠道的消化及吸收功能不良,容易导致叶酸的摄入不足,体内的叶酸、维生素B12含量下降,从而影响了蛋氨酸循环,造成血液Hcy水平升高;另一方面由于肿瘤细胞的分裂增殖快,对叶酸和维生素B12作为辅酶参与核酸形成的需要量也更多,进一步加重患者体内叶酸和维生素B12含量不足,促进疾病的进展。AFP作为PHC的独立危险因素已达成共识。本研究还发现肿瘤标志物CA72-4也是PHC的独立危险因素,张桂芬等[17]研究也证实CA72-4在消化道肿瘤中阳性率较高,对临床消化道肿瘤的诊断具有重要参考意义。耿彩玲[18]的研究还发现CA72-4在PHC患者中水平较高,联合其他肿瘤标志物检测可辅助PHC的早期诊断。本研究结果提示,血清Hcy水平与PHC相关,且能在一定程度上反应临床分期和肝功能损害程度,可作为PHC患者的一项监测指标。通过监测Hcy水平,通过监测Hcy水平,对肝癌的病情评估和预后判断有一定的临床意义。参考文献：[1]中华人民共和国国家卫生健康委员会医政医管局.原发性肝癌诊疗规范(2019年版)[J].中国实用外科杂志,2020,40(2):121-138.[7]李理,汤哲,孙菲,等.北京地区老年人高同型半胱氨酸血症(HHcy)与动脉硬化疾病关系的调查研究[J].北京医学,2016,38(10):980-983.[8]吴子瑜,杨津,郭太林,等.高血压与非高血压脑梗死患者MTHFR基因C667T多态性与同型半胱氨酸水平的相关性[J].中国临床研究,2018,31(4):477-480.[11]张财富.ROC曲线评价血清同型半胱氨酸在消化道肿瘤诊断中的价值[J].中华全科医学,2016,14(10):1726-1728.[12]肖健,熊怀民,钱建平,等.血清同型半胱氨酸在肝炎､肝硬化及肝癌中的诊断价值研究[J].中国卫生检验杂志,2015,25(14):2315-2318.[14]杨婧,俞静.同型半胱氨酸与叶酸在恶性肿瘤中的研究进展[J].中国医院用药评价与分析,2019,19(7):772-774.[15]闫文强,周迎,施铃灵,等.叶酸摄入量差异对大鼠同型半胱氨酸及腹主动脉的影响[J].徐州医学院学报,2016,36(1):37-39.[17]张桂芬,邓为民.血清CA72-4在消化系癌症中的临床应用[J].世界华人消化杂志,2015,23(5):862-865.[18]耿彩玲.血清癌胚抗原､糖类抗原72-4､糖类抗原199的表达与原发性肝癌早期诊断的相关性探讨[J].中国卫生检验杂志,2019,29(23):2879-2881.陈茉莉,夏莉,赵伟,杨武林,胡宗涛.血清同型半胱氨酸与原发性肝癌的相关性研究[J].中华全科医学,2020,18(09):1443-1445+1465.
