伊氏锥虫VSG抗原库的建立及其免疫保护效果检测动物医学论文.doc

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伊氏锥虫VSG抗原库的建立及其免疫保护效果检测_动物医学论文【中文摘要】锥虫(Trypanosome)能通过不断改变膜表面变异糖蛋白(variable surface glyco-protein,简称VSG),逃避宿主免疫反应。VSG是公认的强免疫原,但只能使机体产生针对同型虫体的免疫保护,而对异型虫体不起保护作用。有研究表明锥虫在感染动物早中期产生的变异体数目是有限的,且这些变异体出现的重复率很高,最高可达60%,我们称这些变异体为优势变异体。我们设想提纯全部优势变异体VSG,建立优势VSG抗原库,期望该抗原库能抑制虫体变异或抑制虫体的第二次变异,从而对动物起到较好的免疫保护作用,克服因抗原变异引起的免疫失败。根据锥虫在兔体内可产生不同变异体的特性,将伊氏锥虫云南水牛单克隆株顺序感染五只新西兰大白兔,分离到50个单克隆群体,经间接免疫荧光实验证明:后四只兔子出现第一次虫血症高峰的变异体,均包含在第一只兔体内分离得到的9个优势变异体之内;这50个变异体分属于20个抗原型,即共分离到20个优势变异体。提纯所有优势变异体表面糖蛋白,制备VSG抗原库。用不同剂量抗原库免疫小鼠后进行攻虫,结果显示:经四次免疫后,20μg剂量对随机抽取的两个变异体100条虫体的保护率分别达到83%和67%;改变免疫方法,经三次免疫后的保护效果不理想;用单一VSG抗原免疫小鼠,接种来自不同兔体的同型虫体,不能起到相应保护作用。该抗原库的最佳免疫保护率达到80%以上,它的建立为伊氏锥虫疫苗的研制开辟了一条新的途径。