羊栖菜提取物的降血糖作用研究药学论文.doc

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羊栖菜提取物的降血糖作用研究_药学论文【关键词】羊栖摘要：目的研究羊栖菜提取物对正常及四氧嘧啶所致糖尿病小鼠血糖的影响。方法用四氧嘧啶糖尿病小鼠为模型，以血糖、糖耐量为指标研究羊栖菜提取物的降血糖作用。结果羊栖菜提取物对正常小鼠无降血糖作用；预防性给予羊栖菜粗多糖（350，700 mg・kg1）后，四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖显著降低；羊栖菜粗多糖和醇提物（700 mg・kg1）有治疗作用，能明显降低糖尿病小鼠血糖水平；对正常小鼠和糖尿病小鼠糖耐量无明显改善。结论羊栖菜提取物对四氧嘧啶糖尿病小鼠具有防治作用。关键词：羊栖菜；提取物；四氧嘧啶；血糖Study on the Hypoglycemic Effect of the Extract of Sargassum fusiforme Abstract：ObjectiveTo explore the effect of the extract of Sargassum fusiforme(ESF)on blood glucose in diabetes mice.MethodsEffect of ESF on alloxan-inducing diabetes mellitus model was investigated by blood glucose concentration and glucose tolerance test.ResultsESF can’t decrease the blood sugar level in normal mice.At doses of 350 and 700 mg/kg,SFP(Sargassum fusiforme polysaccharide)has prophylactic effect in diabetic mice.At dose of 700 mg/kg,ESF reduces the blood glucose level significantly.Besides,there’re no marked changes of the glucose tolerance in normal or diabetes mellitus mice.ConclusionThe results show that ESF are active components in protecting against alloxaninduced pancreas injury and mediating the blood glucose level.Key words：Sargassum fusiforme；Extract；Alloxan；Blood glucose羊栖菜Sargassum fusiforme(Harv.)Setchell系马尾藻科植物，干燥藻体全体入药，收载于《中华本草》。其主要功效为消痰软坚，利水消肿，泄热化湿，主治“瘿瘤结气，散颈下硬核痛……”。现代药理研究表明，羊栖菜对心血管功能有影响，能增强免疫功能，有降血脂、抗肿瘤等作用［1］。王兵等［2］研究了羊栖菜多糖的降血糖作用，但其他部分提取物的降糖作用国内外尚无文献报道。本实验用羊栖菜提取物（extract of Sargassum fusiforme，ESF；包括羊栖菜粗多糖和95%醇提物）对实验性糖尿病小鼠进行了研究，旨在为羊栖菜的开发利用提供实验依据。1实验材料1.1实验动物昆明种小鼠，(26±2)g，雄性，由浙江省药品检验所实验动物中心提供。1.2药物与试剂羊栖菜为市售正品（经浙江大学药学院生药教研室郭汉身教授鉴定），购于浙江温州洞头。羊栖菜粗多糖：80℃酶法提取，2次，2 h/次，过滤，合并滤液，浓缩液3倍醇沉，静置，离心，取沉淀，乙醇分级、丙酮洗涤，以P2O5真空干燥沉淀物，即得羊栖菜粗多糖(Sargassum fusiforme polysaccharides，SFP)，经硫酸―苯酚法测定，SFP的多糖含量为56.0%；羊栖菜醇提物（ethanol extract of Sargassum fusiforme，EESF）：按中药常规法用95%乙醇提取2次，分别2和1.5 h，过滤，合并滤液后浓缩成浸膏。实验时用蒸馏水稀释至所需浓度，超声溶解后灌胃给药。四氧嘧啶（Alloxn），Sigma公司生产；达美康，法国施维雅药厂，天津华津制药厂生产，批号020820；盐酸二甲双胍，郑州瑞康制药有限公司生产，批号020108；葡萄糖测定试剂盒，卫生部上海生物制品研究所，卫生部临床诊断试剂实验中心生产，批号020701。其它均为国产分析纯试剂。1.3仪器Jouan MR 18.22离心机；HITACHI U2000分光光度计。2实验方法与结果2.1羊栖菜提取物对正常小鼠血糖的影响取小鼠60只，随机分为6组，严格禁食（不禁水）12 h后，剪尾取血，测定各组血糖值（d0），接着连续给药28 d，1次/d，给药方式均为灌胃。给药组按照原生药量给药；阳性对照组达美康（即格列齐特，Gliclazide）；空白对照组给予等容积的生理盐水。分别于给药14，28 d禁食12 h，剪尾取血测定各组血糖值（Blood Glucose，BG）。结果表明：羊栖菜粗多糖及95%醇提物两个剂量组对正常小鼠均无降血糖作用。(见表1)。表1 ESF对正常小鼠血糖的影响组别（略）剂量2.2羊栖菜提取物对四氧嘧啶糖尿病小鼠的预防和治疗作用2.2.1预防性给予羊栖菜提取物对四氧嘧啶小鼠血糖的影响［3］取小鼠60只，随机分为6组。阳性对照组为盐酸二甲双胍(Deltamine)；空白对照组给予等容积的生理盐水。连续灌胃7 d，于给药后第5天将禁食24 h的小鼠尾静脉注射四氧嘧啶100 mg・kg1 1次［4］，48 h后眼眶采血，测定严格禁食（不禁水）12 h后空腹血糖。结果显示：对照组动物血糖水平较高，而羊栖菜多糖组血糖水平与空白对照组（Alloxandiabetic）比较，均有明显降低（P<0.05～0.01）。表明羊栖菜多糖有预防糖尿病动物血糖水平升高的作用结果见表2。表2 ESF对四氧嘧啶糖尿病小鼠的预防作用组别（略）2.2.2羊栖菜提取物对四氧嘧啶糖尿病小鼠的治疗作用取四氧嘧啶造模成功（血糖值>16.67 mmol・L1）的糖尿病小鼠60只，随机分为6组。阳性对照组为盐酸二甲双胍；空白模型对照组给予等容积的生理盐水。连续灌胃7 d，测定给药7 d后小鼠空腹血糖。结果表明：多糖和醇提物高剂量均能明显降低糖尿病小鼠血糖水平结果见表3。2.3羊栖菜提取物对正常小鼠和实验性糖尿病小鼠糖耐量的影响［5］2.3.1羊栖菜提取物对正常小鼠糖耐量的影响取小鼠150只，随机分成6组，每组25只。灌胃1次/d，连续7 d，末次给药前小鼠严格禁食（不禁水）12 h；末次给药后，每组随机各取5只，测定零时血糖，各组余20只小鼠以葡萄糖2 g・kg1灌胃，于灌胃后30，60，120及180 min各取5只测血糖值。计算各组的AUC值，分别与空白对照组进行比较，发现各给药组对正常小鼠的糖耐量无显著改善作用结果见表4。表3 ESF对四氧嘧啶糖尿病小鼠的治疗作用组别（略）表4 ESF对正常小鼠糖耐量的影响组别（略）2.3.2羊栖菜提取物对实验性糖尿病小鼠糖耐量的影响取糖尿病小鼠150只，随机分成6组，每组25只。灌胃1次/d，连续7 d，末次给药前小鼠严格禁食（不禁水）12 h；末次给药后，每组随机各取5只，测定零时血糖，各组余20只小鼠以葡萄糖2 g・kg1灌胃，于灌胃后30，60，120及180 min各取5只测血糖值。计算各组的AUC值，分别与空白对照组进行比较，各给药组均无明显改善糖尿病小鼠糖耐量的作用结果见表5。表5 ESF对实验性糖尿病小鼠糖耐量的影响组别（略）3讨论四氧嘧啶化学试剂诱导的高血糖模型作用机制是利用其选择性破坏胰岛β细胞，使胰岛素分泌不足而引起高血糖模型。本研究结果表明，羊栖菜提取物对四氧嘧啶引起的糖尿病有明显的防治作用，这一作用可能是该提取物减弱了四氧嘧啶对胰岛β细胞的损伤或改善受损伤的β细胞的功能所致，可试用于糖尿病患者。同时，羊栖菜提取物对正常小鼠的血糖水平无明显影响，亦不能增强正常小鼠的负荷糖耐量，说明羊栖菜的降血糖作用不是通过刺激胰岛素分泌来实现的。多糖有广泛的生物学活性，很多天然药物中提取得到的多糖均被证实有降血糖作用［6］。笔者对羊栖菜95%醇提物浸膏中所含化学成分进行分析鉴定发现，该部分中含有酚类、内酯、甾萜类等。推测可能是这些成分对糖尿病小鼠有治疗作用。膳食治疗是糖尿病基本的治疗措施。羊栖菜在我国沿海很常见，有很多地方把它作为食用性海藻。海藻类植物富含粗纤维，既能控制受试者摄人的总热量，降低体重，又能增加饱腹感，减轻糖尿病患者饥饿的痛苦；同时羊栖菜具有降血脂及抗衰老等药理活性，这些对改善糖尿病病人的生存质量有显著意义。综上所述，羊栖菜提取物有进一步的研究开发价值，可望成为新型的天然降糖新药。参考文献：［1］国家中医药管理局《中华本草》编委会.《中华本草》精选本（上册）［M］.上海:上海科学技术出版社,1998:158.［2］王兵,李靖,马舒冰,等.羊栖菜多糖降血糖作用的实验研究［J］.中国海洋药物,2000,3:33.［3］章灵华,肖培根．灵芝孢子粉提取物对实验性糖尿病的防治作用［J］.中草药，1993,24(5):246.［4］徐淑云,卞如濂,陈修药理实验方法学,第2版［M］.北京:人民卫生出版社,1994:1265.［5］Kumud Kumari,K.T.Augusti.Antidiabetic Effects of S-Methylcysteine Sulphoxide on Alloxan Diabetes［J］.Planta Med,1995,61:72.［6］张华芳,李士敏.降血糖天然药物研究进展［J］.中草药,2000,31:184.