灯盏花素改善D-半乳糖引起小鼠疲劳的作用研究药学论文.doc

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灯盏花素改善D-半乳糖引起小鼠疲劳的作用研究_药学论文作者：缪红石艳华苏丙凡程建军商亚珍【摘要】目的研究灯盏花素（Breviscapine）对D-半乳糖引起小鼠疲劳的改善作用。方法小鼠腹腔注射(Introperitoneal injection,ip)120 mg/kg D-半乳糖48 d制备衰老模型，通过小鼠自主活动和游泳负重实验，评价灯盏花素对D-半乳糖引起小鼠疲劳的作用。结果D-半乳糖明显引起小鼠出现疲劳症状，与空白对照组相比，D-半乳糖组小鼠(120 mg/kg,ip,48 d)自主活动次数和负重游泳时间显著降低。5，10和20 mg/kg灯盏花素不同程度地降低D-半乳糖引起小鼠上述疲劳症状。结论灯盏花素对D-半乳糖引起小鼠疲劳症状有明显的改善作用。【关键词】灯盏花素D-半乳糖疲劳自主活动游泳负重实验Abstract：Objective To study the improving effects of breviscapine on fatigue induced by D-galactose in mice.MethodsThe aging model of mice was produced by introperitoneal injection of 120 mg/kg D-galactose for 48 d.The anti-fatigue effects of breviscapine were assessed by the mice of automatic action and experiment of swimming with weight.ResultsD-galactose(120 mg/kg,ip,48 d)significantly caused fatigue symptoms in mice.Compared with control group mice,the D-galactose mice showed a lowered automatic action number and a shortened swimming time with weight.5,10 and 20 mg/kg breviscapine markedly improved the above fatigue symptoms in D-galactose rats in different degree.ConclusionBreviscapine can ameliorate fatigues induced by D-galactose in mice.Key words：Breviscapine；D-galactose；Fatigue；Automatic action；Experiment of swimming with weight疲劳是生命活动正常的生理反应，运动耐力的提高是对抗疲劳、增强体质的有效手段［1］。实验室采用一系列动物模型来研究疲劳的发生、发展、反应机制和抗疲劳药物筛选，如小鼠游泳负重实验、爬杆实验以及肝糖元、SOD和MDA的测定等。因此，一种药物如果对上述指标表现正向调节作用，可以预示该药物具有抗疲劳作用的可能。灯盏花又名灯盏细辛，药用为菊科植物短亭飞蓬的全草，其提取成分灯盏花素（Breviscapine）是黄酮类化合物，是灯盏花乙素和灯盏花甲素的混合物，以灯盏花乙素为主［2］。我们以前的工作已经证实灯盏花素能够抗脑缺氧、改善D-半乳糖引起的记忆障碍［3，4］，但对D-半乳糖引起小鼠疲劳的作用未见报道。本实验利用ip D-半乳糖48 d建立衰老模型，通过自主活动和负重游泳实验探讨灯盏花素抗疲劳作用。1材料昆明种小鼠（22~24 g，♀/♂，本院实验动物中心提供）；灯盏花素（云南省玉溪望子龙生物制药有限公司生产）；小鼠自主活动分析仪（中国医学科学院药物研究所提供）；铅片。2方法2.1程序50只小鼠，雌雄各半，随机分为5组，即空白对照组、D-半乳糖组和灯盏花素小、中、大3个剂量组，除空白对照组外,各组小鼠分别连续ip 120 mg/kg D-半乳糖48 d,药物组小鼠在ip D-半乳糖的同时，分别连续皮下注射（Subcutaneous injection，sc）5，10和20 mg/kg灯盏花素48 d，1次/d，空白对照组给等体积的蒸馏水。在sc药物第48天末次给药30 min后，测定小鼠自主活动和负重游泳实验。2.2小鼠自主活动测试在sc药物第48天末次给药30 min后，利用小鼠自主活动分析仪测试小鼠自主活动，记录各组小鼠3 min活动的次数。2.3小鼠负重游泳时间测试所有小鼠在自主活动测试完成后，在尾部按体重的6%~8%负重（3 g铅皮），小鼠置水深20 cm，水温（20±0.5）℃的水池内，记录小鼠自放入水中，至头部沉入水中10 s不能浮出水面计为小鼠负重游泳时间。3结果3.1灯盏花素对D半乳糖小鼠自主活动的影响在小鼠自主活动测试中，与空白对照组小鼠相比，D-半乳糖组小鼠自主活动次数降低了27.54%（P<0.05）；而3个剂量灯盏花素能够翻转D-半乳糖小鼠自主活动次数降低，5，10和20 mg/kg灯盏花素分别使D-半乳糖组小鼠活动次数增加了33.88%（P<0.05）、38.02%（P<0.05）和56.20%（P<0.01），3个剂量作用表现为剂量依赖性关系（见表1）。3.2灯盏花素对D半乳糖小鼠负重游泳时间的影响在小鼠负重实验测试中，与空白对照组小鼠相比，D-半乳糖组小鼠负重游泳时间降低了55.85%（P<0.01）；而5，10和20 mg/kg灯盏花素皆能增加D-半乳糖小鼠对抗疲劳能力，三剂量药物组小鼠负重游泳时间是D-半乳糖小鼠的1.16（P>0.05），2.21（P<0.01）和2.30（P<0.01）倍，且这种作用呈剂量依赖性关系，药物表现为较强的抗疲劳作用。结果见表1。表1灯盏花素对半乳糖小鼠自主活动和负重游泳时间的影响（略）与对照组比较，##P<0.05，##P<0.01；与D-半乳糖组比较，*P<0.05，**P<0.01；n=10 4讨论疲劳是生命活动正常的生理反应，运动耐力的强弱和持续时间的长短是评价疲劳的主要指标［1］。实验室有许多方法来模拟动物疲劳，如小鼠尾部负重限制小鼠躯体活动，使其挣扎、急躁、愤怒、抑郁最后表现为运动能力降低、力量耗竭，出现“疲劳”的症状［5］。动物的自主活动是反映动物中枢兴奋的重要指标，中枢兴奋性强，自主活动增加；中枢兴奋性抑制，自主活动次数减少，因此自主活动也是评价动物运动能力的重要指标［6］。一系列研究表明，运动迟缓、耐力降低以及反应迟钝是衰老的明显表现。实验室中常采用慢性投递D-半乳糖制备实验动物衰老模型，表现为记忆减退、免疫功能降低、耐力降低以及反应迟钝［7］。本实验发现ip 48 d D-半乳糖小鼠自主活动次数和负重游泳时间显著降低，与文献报道一致；但5，10和20 mg/kg灯盏花素明显翻转D-半乳糖引起小鼠上述异常改变，由此表明灯盏花素具有抗疲劳作用。灯盏花素是从灯盏细辛中分离得到的黄酮类化合物，能够提高ATPase活性、调节糖和能量代谢，保护肝、肾功能［2］，特别是对自由基系统调节都有利于其抗衰老作用，而对D-半乳糖引起的运动迟缓和耐力降低的改善正是灯盏花素抗疲劳作用的重要表现，其作用机制还有待于进一步探讨。【参考文献】［1］潘育方，邹燕.三七皂苷Rg1抗疲劳和耐缺氧作用的研究［J］.临床和实验医学杂志，2006，5（8）：1120.［2］林雄，褚克丹.灯盏花素的药理学研究进展［J］.海峡医药，2005，17（6）：5.［3］石艳华,缪红,苏丙凡，等.灯盏花素对D-半乳糖引起小鼠记忆障碍的改善作用［J］.时珍国医国药，2008，19（6）：1445.［4］姜兆蕊,李静,韩志峰，等.灯盏花素抗小鼠脑缺氧作用［J］.时珍国医国药，2007，18（10）：2372.［5］乐进，张桂才，黄河，等.健力怡神膏对慢性疲劳模型小鼠的影响［J］.中国中医药信息杂志，2007，14（4）：39.［6］涂人顺，张国玺，孙斌辉.关于小鼠自主活动规律的研究［J］.中国药理学通报，2002，18（4）：464.［7］龚国清，徐黻本.小鼠衰老模型的研究［J］.中国药科大学学报，1991，22（02）：101.