抗癌解毒方抗肿瘤作用的实验研究临床医学论文.doc

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抗癌解毒方抗肿瘤作用的实验研究_临床医学论文作者：何燕清，郑作文，陆桂喜【关键词】抗癌解毒方摘要:目的:评价抗癌解毒方的抗肿瘤作用、对免疫功能的影响作用。方法:用昆明种小鼠，灌胃给药，环磷酰胺造模，60 Co照射，肝癌H22瘤株模型，脾淋巴细胞增殖测定，血清溶血素测定，碳廓清实验，迟发超敏试验等方法观察相关指标。结果:抗癌解毒方能明显延长60 Co照射小鼠的生存时间;可明显抑制H22小鼠瘤体的生长，对H22小鼠的生存时间有一定延长作用;与环磷酰胺合用对H22小鼠瘤体有一定协同抑制作用;对环磷酰胺引起的H22小鼠溶血素的降低有明显提高作用，但对环磷酰胺引起的H22小鼠碳廓清率的降低拮抗作用不明显;对H22小鼠迟发超敏反应作用不明显;对小鼠脾淋巴细胞有明显的增殖作用。结论:抗癌解毒方有抗肿瘤、促进免疫的作用。关键词:抗癌解毒方;抗肿瘤;免疫“抗癌解毒方”（以下简称KAF），为广西柳州市肿瘤医院所研制，临床对放疗、化疗癌症患者有明显提高白细胞及一定抗肿瘤作用。该方主要由生晒参、黄芪、茯苓、当归、枸杞、白花蛇舌草等中药组成。为此我们对该方进行了抗肿瘤、促进免疫的药理实验，现将结果报告如下。1实验材料1.1药物制备KAF方中，生晒参第1次用8倍量95%乙醇回流2h，第2次用6倍量95%乙醇回流1h，回收乙醇，浓缩备用;醇提后的生晒参及处方中黄芪、茯苓、当归、枸杞、白花蛇舌草等药物第1次用10倍水提取2h，第2次用8倍水提取1h，两次药液合并浓缩，浓缩液与生晒参乙醇浓缩液合并混匀，浓缩至药物浓度为2g生药/ml备用。1.2试剂参芪片（由11味中药组成），吉林恒和制药股份有限公司生产，批号:20020303;氟尿嘧啶（5-FU）注射液，上海旭东海普药业有限公司生产（上海市浦东金桥金沪路879号），批号:010807;环磷酰胺（CPA），上海华联制药有限公司生产，批号:010914;盐酸左旋咪唑，吉林南药股份有限公司，批号:020301;刀豆蛋白（ConA），Sigma公司，批号:030808;2，4-二硝基氯苯（DNCB），上海试剂仪器厂，批号:982021。1.3动物昆明种小鼠，普通级（CV），由广西中医学院实验动物中心提供，动物合格证号:桂医动字第11004号。1.4仪器722型分光光度计，上海第三分析仪器厂制造;遥控酶标仪，型号:SUNRISE，奥地利生产;CO60 765型远距离治疗机，加拿大生产;2方法及结果2.1对60 Coγ射线照射小鼠生存时间的影响［1］取小鼠50只，体重（20±2）g，♀♂兼用，随机分为5组。ig给药，给药容积为30ml/kg。1次/d连续14d。空白对照组、照射对照组给生理盐水。给药后第8天60 Coγ射线7.5Gy1次性全身照射，照射时间6min52s。观察小鼠的存活天数（从照射至死亡日期），结果见表1。表1 KAF对60 Coγ射线照射小鼠生存时间的影响（略）结果显示，KAF高剂量组小鼠存活时间比照射对照组长，差异有显著性意义，提示KAF可明显延长60 COγ射线照射小鼠的生存时间。2.2对H22瘤株小鼠生存时间的影响［2］取小鼠55只，体重（20±2）g，♀♂兼用，随机分为5组。ig给药，给药容积为30ml/kg，1次/d连续14d，空白对照组给生理盐水。给药后第8d无菌条件下取H22瘤液，以生理盐水1∶5稀释，各组小鼠均腹腔接种H22瘤细胞悬液0.2ml/只，观察小鼠存活天数，结果见表2。表2 KAF对H22瘤株小鼠生存时间的影响（略）结果显示，KAF高、中剂量组对H22瘤株小鼠生存时间较对照组长，但差异无显著性意义，提示KAF对H22瘤株小鼠生存时间有一定延长作用。2.3对荷瘤H22小鼠瘤体生长的影响［2］取体重17～22g小鼠52只，♀♂兼用，无菌条件下取H22瘤液，以生理盐水1∶5稀释，每只小鼠腋窝皮下注射0.2ml，将接种小鼠随机分为5组。于接种瘤株24h后开始ig给药，给药容积为30ml/kg，1次/d连续10d，空白对照组给生理盐水。第11d脱颈椎处死动物，取瘤块称重，计算肿瘤及肝脾抑制率，结果见表3。结果显示，KAF高剂量组瘤重及瘤重系数小于对照组，中剂量组瘤重系数小于对照组，差异有显著性意义，提示KAF对H22小鼠肿瘤生长有明显抑制作用。表3 KAF对H22小鼠瘤重的影响（略）2.4 KAF和CPA合用对荷瘤H22小鼠瘤体生长的影响［2］取体重20～22g小鼠50只，♀♂兼用，随机分为5组。ig给药，1次/d连续给药14d，给药容积为30ml/kg，空白对照组给生理盐水。从第6d开始KAF高、中、低剂量组及CPA组隔日腹腔注射1次CPA。第6d给药后1h接种瘤株，第15天脱颈椎处死动物，取瘤块称重，计算肿瘤的抑制率重复2次实验，结果见表4。表4 KAF对H22小鼠瘤重的影响（略）结果显示，KAF高、中、低剂量+CPA组瘤重及瘤重系数均明显小于对照组，提示KAF与CPA合用均有明显的抑制肿瘤作用;KAF高、中剂量+CPA组瘤重及瘤重系数均比CPA组较小，但无显著性差异，提示KAF与CPA合用有一定的协同作用。2.5对H22瘤株小鼠血清溶血素的影响［3，4］取体重（20±2）g小鼠60只，♀♂兼用，在无菌条件下抽取小鼠H22瘤液，按1∶6稀释，每只小鼠均腹腔注射0.2ml。接种后随机分为4组。从第6天开始KAF高、低剂量组及CPA组隔日腹腔注射1次CPA，第8天腹腔注射5%鸡红细胞生理盐水混悬液0.2ml/只致敏。结果见表5表5 KAF对血清溶血素水平的影响（略）结果显示，KAF高、低剂量+CPA组溶血素含量比CPA组高，差异有显著性意义，提示KAF对CPA引起的H 22小鼠血清溶血素的降低有明显升高作用。2.6对H22瘤株小鼠碳廓清率的影响［3］取体重（20±2）g小鼠60只，♀♂兼用，腹腔接种H22瘤株（方法同5），随机分为5组。灌胃1次/d，给药容积为30ml/kg，连续给药14d，空白对照组灌胃生理盐水。从第6天开始KAF高、中、低剂量组及CPA组隔日腹腔注射1次CPA20mg/kg。结果见表6。表6 KAF对H22小鼠碳廓清率的影响（略）结果显示，KAF高、中、低剂量+CPA组吞噬指数和吞噬系数与CPA组比较差异无显著性意义，提示KAF对CPA引起的H22小鼠碳廓清率的降低无明显提高作用。2.7对H22瘤株小鼠迟发超敏反应的影响［5］取小鼠60只，体重（20±2）g，雌雄兼用。随机分为5组。于第4天无菌条件下抽取H22瘤液，以生理盐水1∶6稀释，每鼠腋下皮下注射0.2ml/只。结果见表7。表7 KAF对H22小鼠迟发超敏反应的影响（略）结果显示，KAF高、中、低剂量组与空白组比较差异无显著性意义，提示KAF对H22小鼠迟发超敏反应作用不明显。2.8对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响［6］取小鼠25只，体重（20±2）g，♀♂兼用，随机均分为5组。ig给药，给药容积为30ml/kg，除左旋咪唑组隔天给药外，其余各组每天给药一次，连续10d，空白对照组给生理盐水。结果见表8。表8 KAF对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响（略）结果显示，KAF高剂量组OD值高于对照组，差异有显著性意义，提示KAF对小鼠脾淋巴细胞有明显增殖作用。3小结KAF能明显延长60 Co照射小鼠的生存时间;可明显抑制H22小鼠瘤体的生长，对H22小鼠的生存时间有一定延长作用;与环磷酰胺合用对H22小鼠瘤体有一定协同抑制作用;对环磷酰胺引起的H22小鼠溶血素的降低有明显提高作用，但对环磷酰胺引起的H22小鼠碳廓清率的降低拮抗作用不明显;对H22小鼠迟发超敏作用不明显;对小鼠脾淋巴细胞KAF有明显的增殖作用。综上所述，KAF有抗肿瘤、促进免疫的作用。参考文献:［1］陈建业，曾益新，陈小君，等.护生宝口服液对辐射的防护研究［J］.中华放射医学与防护杂志，2000，20（4）:273-273.［2］严茂祥，陈芸芸，项百康，等.金针菇多糖对小鼠移植性肿瘤抗瘤效应的实验研究［J］.中国中医药科枝，1999，6（6）:379-379.［3］李伟芳，韦宝伟，刘宗河，等.金蒲抑瘤片的药效和毒理研究［J］.广西医科大学学报，2002，19（3）:307-307.［4］古建立，李东升，郭成贤，等.化岩胶囊对S180荷瘤小鼠免疫功能的影响［J］.新中医，2002，34（12）:63-63.［5］陈华圣，许爱华，顾维，等.扶正抗癌冲剂增强免疫功能的实验研究［J］.南京中医药大学学报，1995，11（2）:76-76.［6］邵启祥，徐芬红，夏圣，等.黄芪对免疫功能的调节作用［J］.镇江医学院学报，1994，4（4）:261-261.