治疗鼻炎中药复方制剂的抗过敏作用_药学论文作者：夏玉凤，戴岳，毕培曦，陈耀邦【摘要】目的观察4种治疗鼻炎的中药复方制剂对速发型过敏反应的影响，分析其中的有效中药。方法抗原攻击前1 h，给小鼠口服受试药物,观察其对异种被动皮肤过敏反应的作用；体外实验中,将药物与大鼠腹腔肥大细胞共同温孵,观察其对compound 48/80诱导组胺释放的影响。结果速效鼻敏感丸、林金生鼻敏清胶囊及和春堂鼻敏清片明显抑制小鼠异种被动皮肤过敏反应,减少compound 48/80诱导的组胺释放,而速效鼻敏素胶囊对被动皮肤过敏反应无明显影响；速效鼻敏感丸及和春堂鼻敏清片主要组成药物九里明、卷柏和苍耳子显著抑制小鼠异种被动皮肤过敏反应,而白芷、辛夷和决明子无明显作用。结论速效鼻敏感丸、和春堂鼻敏清片及林金生鼻敏清胶囊具有抗过敏活性,九里明和卷柏可能为速效鼻敏感丸及和春堂鼻敏清片的有效组分,苍耳子亦可能为速效鼻敏感丸的有效组份之一。【关键词】鼻炎被动皮肤过敏反应肥大细胞组胺AbstractObjectiveTo observe the antiallergic properties of four herbal products used for the treatment of rhinitis,and explore the effective ingredients.MethodsTest samples were orally administered 1 h before the challenge of antigen,the effects on heterologous passive cutaneous anaphylaxis(PCA)in mice were observed.In vitro,test samples were incubated with rat peritoneal mast cells before activation of compound 48/80,the inhibitory effects on histamine release were studied.ResultsPe Min Kam Wan,Lam Kam Sang Nasalin and Wo Chun Tong clearly inhibited PCA in mice and reduced histamine release from rat mast cells induced by compound 48/80.But，Sinuwell did not affect the PCA.In addition,the ethanol extracts from Senecio scandens,Selaginella tamariscina and Xanthium sibiricum significantly inhibited PCA in mice,but the extracts from Angelica dahurica,Magnolia liliflora and Cassia tora failed to affect it.Conclusion Pe Min Kam Wan,Lam Kam Sang Nasalin and Wo Chun Tong possess antiallergic activities.Senecio scandens and Selaginella may be the effective ingredients of Wo Chun Tong and Pe Min Kam Wan,and Xanthium sibiricum may also be one of the effective ingredients of Pe Min Kam Wan.Key wordsRhinitis;Passive cutaneous anaphylaxis;Mast cell;Histamine鼻炎是一种常见病、多发病,在中国香港约30%的儿童有鼻炎的症状(如喷嚏、鼻塞和鼻充血)。鼻炎按病因可分为过敏型和非过敏型两大类,其中以前者较为常见。目前对鼻炎尚缺乏特异性的治疗药物，临床常采用抗过敏药物、抗感染药物及充血抑制剂等缓解症状。在中国香港市售的治疗鼻炎中药制剂有近10种,绝大多数来自经验方,缺乏药理学实验的有效论证和支持。本文选择较为常用的4种复方制剂，观察其对速发型过敏反应的影响,探讨其有效组成药物。1材料与方法1.1动物雄性ICR小鼠,体重18～22 g,雄性SD大鼠，体重180～200 g,购自香港中文大学实验动物中心。1.2试剂卵白蛋白(ovalbumin)和compound 48/80,Sigma公司产品；灭活百日咳杆菌(Bordetella pertussis)、Ficoll和邻苯甲醛(o-phthalaldehyde,OPT),Wako公司产品；色甘酸二钠(disodium cromoglycate,DSCG),Biomol公司产品。1.3药物速效鼻敏感丸(Pe Min Kam Wan),香港济众堂中药厂产品,批号47890；林金生鼻敏清胶囊(Lam Kam Sang Nasalin),香港欧美制药厂有限公司产品,批号010603；速效鼻敏素胶囊(Sinuwell),香港利高曼草本制药厂有限公司产品,批号0201201；和春堂鼻敏清片(Wo Chun Tong coated herbal tablets for nostril diseases,Wo Chun Tong),香港和春堂中药圃(国际)有限公司产品,批号002075；药材购自香港药材市场，九里明,菊科植物九里明Senecio scandens Buch.-Ham.的干燥全草；决明子,豆科植物小决明Cassia tora L.的种子；卷柏,卷柏科植物卷柏Selaginella tamariscina(Beauv.)Spring的干燥全草；白芷,伞形科植物白芷Angelica dahurica(Fisch.Ex Hoffm.)benth.的根；辛夷,木兰科植物紫玉兰Magnolia liliflora Desr.的花蕾；苍耳子,菊科植物苍耳Xanthium sibiricum Patrin.的果实。上述6种药材经粉碎后以6～7倍量70%乙醇提取3次,1 h/次，以滤纸过滤后,回收乙醇,经冷冻干燥得浸膏粉末,收率分别为5.9%，9.6%，7.3%，13.7%，12.9%和6.6%。1.4小鼠异种被动皮肤过敏反应按文献［1］方法制备大鼠抗卵白蛋白抗血清。在小鼠左、右耳廓内注入经生理盐水5倍稀释的大鼠抗血清10μl,48 h后静脉注射1%Evans蓝生理盐水溶液(内含卵白蛋白1 mg·ml-1)10 ml·kg-1，30 min后放血处死小鼠,取两侧耳廓,分别置于1 N KOH溶液中消化过夜,以0.6 N H3PO4中和,经丙酮抽提,610 nm处测定吸收值,由标准曲线计算每耳Evans蓝渗出量,各鼠的数据以左、右耳廓的均值表示。实验组于卵白蛋白攻击前1 h,口服给药1次(1 g·kg-1),对照组给予等体积蒸馏水(20 ml·kg-1)。1.5 Compound 48/80诱导大鼠腹腔肥大细胞释放组胺［2］将大鼠放血处死,腹腔注射Hank’s液20 ml,轻轻按摩2 min,收集腹腔液,以Ficoll梯度离心法分离肥大细胞,经磷酸缓冲液洗涤4次,肥大细胞的纯度约为91%,调整细胞浓度至2×106·ml-1。取肥大细胞悬液0.9 ml,在37℃预温孵10 min,加入受试样品50μl，温孵5 min后,试管中加入compound 48/80 50μl(终浓度为0.5μg·ml-1),自发释放管中加入磷酸缓冲液50μl,温孵10 min后,将试管转移至冰浴冷却,终止反应。3 000 r/min离心10 min,以荧光法测定上清液(释放量)及沉淀中(残留量)的组胺含量。组胺释放率按下式计算：释放率(%)=(释放量-自发释放量)/(释放量+残留量)×100%。1.6统计学处理实验结果以±s表示，组间差异以t检验作统计学处理。2结果2.1复方制剂对小鼠异种被动皮肤过敏反应的影响由表1可见，于抗原攻击前口服给药1次，速效鼻敏感丸、林金生鼻敏清胶囊及和春堂鼻敏清片均显著减轻小鼠耳异种被动皮肤过敏反应，而速效鼻敏素胶囊无明显影响。表1复方制剂对小鼠耳异种被动皮肤过敏反应的影响(略)2.2复方制剂对Compound 48/80诱导大鼠腹腔肥大细胞释放组胺的影响速效鼻敏感丸、和春堂鼻敏清片及林金生鼻敏清胶囊(50,200μg·ml-1)对compound 48/80诱导的大鼠腹腔肥大细胞释放组胺均呈显著的抑制作用,在低浓度下,以速效鼻敏感丸及和春堂鼻敏清片的抑制作用较强。结果见表2。表2复方制剂对Compound 48/80诱导大鼠腹腔肥大细胞释放组胺的影响(略)2.3速效鼻敏感丸及和春堂鼻敏清片主要组成中药对小鼠异种被动皮肤过敏反应的影响速效鼻敏感丸的成分及含量分别为:苍耳子20%，九里明10%，决明子10%，辛夷10%，连翘10%，野菊花10%，白芷5%，卷柏5%，防风5%，细辛5%，金银花5%，藿香5%；和春堂鼻敏清片的成分及含量分别为：九里明56.14%，卷柏32.7%，决明子7.61%，羌活0.51%，川芎0.25%，白芷0.25%。由表3可见,两方中含量较高的组分或共有组分九里明、卷柏及苍耳子明显抑制小鼠异种被动皮肤过敏反应,而决明子、白芷及辛夷无显著影响。表3速效鼻敏感丸及和春堂鼻敏清片主要组成（略）3讨论过敏性鼻炎的病理生理机制为速发型过敏反应,即患者血清中免疫球蛋白E(Ig E)水平异常升高,以致对花粉、霉菌、尘螨及动物皮屑等抗原出现高敏感性［3］。本研究发现速效鼻敏感丸、林金生鼻敏清胶囊及和春堂鼻敏清片能明显减轻小鼠异种被动皮肤过敏反应、体外实验中,上述复方制剂对compound 48/80诱导大鼠腹腔肥大细胞释放组胺亦呈现显著的抑制作用,表明其抗过敏活性可能与稳定肥大细胞膜、减少组胺等过敏介质的释放有关,本研究结果为上述3种中药用于过敏性鼻炎的治疗提供了理论依据。本文尚对抗过敏活性较强的和春堂鼻敏清片及速效鼻敏感丸的有效组分进行了初步探索，发现两方中含量较高的组分或共有组分九里明、卷柏和苍耳子提取物均具有明显的抗过敏活性,而决明子、白芷及辛夷等提取物无明显作用,提示九里明和卷柏可能为上述两方的有效组成药物，速效鼻敏感丸的有效组成药物还包括苍耳子。【参考文献】［1］Matsuda H,Dai Y,Ido Y,et al.Studies on Kochiae Fructus IV.Antiallergic effects of 70%ethanol extract and its component,momordin Ic from dried fruits of Kochia scoparia L［J］.Biol Pharm Bull,1997,20：1165.［2］Kubo M,Matsuda H,Tokuoka K,et al.Anti-inflammatory activities of methanolic extract and alkaloidal components from Corydalis tuber［J］.Biol Pharm Bull,1994,17：262.［3］Skoner DP.Allergic rhinitis:Definition,epidemiology,pathophysiology,detection,and diagnosis［New Perspectives on Pediatric Allergic Rhinitis］［J］.J Allergy Clin Immunol,2001,108：S2.
