研究地锦草槲皮素提取工艺药学论文.doc

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研究地锦草槲皮素提取工艺_药学论文摘要：目的对地锦草的提取工艺进行研究。方法采用正交试验法，以槲皮素的含量为考察指标进行试验。结果用地锦草重量10倍量的体积分数为75%的乙醇作为提取溶剂，提取2 h，共提取3次为最佳方案。结论提取方法操作简单、方便，为地锦草槲皮素提取工艺的进一步研究提供了依据。关键词：地锦草；槲皮素；提取工艺；正交试验Abstract:Objective Optimum extraction technology of triterpene acids of medicine Herba euphorbiae Humifusae was studied with orthogonal test.Method The experiment design of triterpene acids of herba euphorbiae humifusae was made using orthogonal from L9（34）.The four factors，the data of alcohol concentration，extractive time;adding solvent volume and extractive times were selected，and the three levels from each of the four factors were chosen.Results The experiment results showed that optimum extractive technology of coarse powder of herba euphorbiae humifusae adding ten-time volume of 75%ethanol and then reflux extracting for 2.0 h and extracting 3 times was the best.Conclusion The method is simple，convenient,and this extraction procedure is helpful for further study of extraction technology of triterpene acids of Herba euphorbiae Humifusae.Key words:Herba euphorbiae Humifusae;triterpene acids;extractive technology;orthogonal test地锦草Herba euphorbiae Humifusae为大戟科双子叶一年生草本植物，全草入药，具有凉血止血、清热止痢、通乳汁、清热解毒、利湿退黄、凉血止血等功效，用于治疗痢疾、外伤出血、乳汁不足、肠炎、咳血、便血、崩漏等症［1］。地锦草主要含槲角素甙及素、山素甙及素、地锦草素的黄酮类化合物［2］，药理研究证实槲皮素、山柰素等黄酮类化合物是地锦草抗菌、止血、抗氧化的主要有效成分，地锦草煎剂、醇提取液及地锦草素均有抗菌止血等作用［3］。为研究地锦草的有效成分，探索地锦草槲皮素提取的最适条件，本文以槲皮素为考察指标，采用正交试验方法对地锦草槲皮素提取工艺进行了研究。1仪器与试药高效液相色谱仪：LC-10Avp紫外检测器，LC-10ATvp泵（日本岛津公司）；FA1104N型电子分析天平（上海精密科学仪器有限公司）；数显恒温水浴锅（金坛富华仪器有限公司）；GZX-9240MBE型电热恒温鼓风干燥箱（上海博迅实业有限公司医疗设备厂）。槲皮素对照品(008129304，中国药品生物制品检定所)；地锦草，为Herba euphorbiae Humifusae的干燥全草；乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂均为分析纯。2方法与结果2.1正交试验设计依据对地锦草醇提工艺的预实验情况及槲皮素的理化性质［4］，确定以提取溶剂乙醇的体积分数、提取时间、提取溶剂乙醇用量以及提取的次数为考察因素，每个因素设立3个水平(见表1)。采用L9(34)正交试验设计表，以地锦草提取物中槲皮素的含量为考察指标进行试验。2.2样品溶液的制备取地锦草药材粗粉精密称取9份，每份5.0 g，按L9(34)组合试验条件进行加热回流提取，合并滤液，备用。2.3槲皮素的含量测定方法表1正交试验因素水平表（略）Tab.1 Factors and levels 2.3.1色谱条件岛津ODS色谱柱(4.6 mm×150 mm，5μm)；流动相：乙腈-20.4%磷酸(体积比40∶60)，流速1.0 mL·min-1，检测波长370 nm。2.3.2对照品溶液制备精密称定槲皮素对照品适量，加甲醇溶解，制成每1 mL含0.1 mg槲皮素的对照品贮备液。精密吸取1 mL贮备液，置10 mL容量瓶中，加甲醇定容至刻度，即为对照品溶液。2.3.3标准曲线的绘制取对照品溶液分别进样3、6、9、12、15、18μL，测定峰面积，以峰面积积分值为纵坐标，槲皮素进样量为横坐标绘制标准曲线，得回归方程为:Y=3815.96X-5.61，r=0.9996。槲皮素的质量浓度在0.03～0.18μg/mL范围内具有良好的线性关系［5］。2.3.4样品测定取上述按L9(34)组合试验条件进行试验所制备的样品液，过滤，取滤液用高效液相法进行测定，并计算各种提取条件下槲皮素的含量［6］。2.4试验结果地锦草药材粗粉按L9(34)组合试验条件进行提取处理，其正交试验设计及结果分析见表2。表2正交试验设计及结果分析（略）Tab.2 Orthogonal test and results对正交设计试验结果进行分析，结果表明：提取溶剂乙醇的浓度体积分数和提取溶剂用量对比提取时间以及提取的次数对试验结果的影响要大一些，影响地锦草提取物中槲皮素含量提取水平的次序由大到小的排列依次为：A2﹥C3﹥B3﹥D3，即以地锦草重量10倍。