千金妇炎舒对盆腔炎的治疗作用研究药学论文.doc

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千金妇炎舒对盆腔炎的治疗作用研究_药学论文【摘要】目的研究千金妇炎舒的主要药效作用。方法采用细菌性致炎、化学性烧伤致炎、非特异型炎症以及免疫功能低下等药理模型。结果千金妇炎舒能明显降低模型大鼠全血及血浆粘度、血小板聚集率，减少子宫重量系数，改善模型大鼠子宫的病理组织损害，能抑制角叉菜胶引起的大鼠足肿胀及二甲苯致小鼠耳壳肿胀，减少乙酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性的增加，能提高环磷酰胺所致免疫功能低下的碳廓清指数及吞噬指数。结论千金妇炎舒具有较明显的抗菌、抗炎、改善血液流变学指标及免疫调节作用。【关键词】千金妇炎舒大肠杆菌抗炎免疫调节Abstract:ObjectiveTo investigate the main therapeutic effects of QianJinFuYanShu.MethodsBacterial inflammation models induced by mixture of several kinds of bacterials,chemical inflammation models induced by hydroxybenzene mucilage,other nonspecific inflammation models and immunodepression models were applied.ResultsQianJinFuYanShu could obviously decrease the whole blood viscosity,plasma viscosity and platelet aggregation rate,diminish uterus coefficient and relieve the damage of uterus tissue in rat models of inflammation.It also had an inhibitory effect on rat thenar swelling induced by carrageenan and mouse auricular swelling induced by xylene.Besides,QianJinFuYanShu could significantly inhibit capillary permeability of abdominal cavity induced by glacial acetic acid in mice,increase the carbon granular clearance index and phagocytes index of immunodepression induced by cyclophosphamide.ConclusionQianJinFuYanShu has an obvious anti-inflammatory and antibacterial effects,improve hemorheology indices as well as immunoregulation.Key words:QianJinFuYanShu；Colibacillus；Anti-inflamation；Immunoregulation千金妇炎舒为本实验室自制的一种棕色浸膏，用于治疗各种原因引起的慢性盆腔炎。我们根据其临床功能主治进行了千金妇炎舒的抗菌消炎、活血化淤及免疫调节作用的研究，为临床用药提供实验依据。1器材1.1药品及试剂千金妇炎舒为棕色浸膏，1 ml浸膏相当于5.33 g生药，由本实验室自制，批号：060330。推荐人日用量为20.16 g生药/60 kg；妇科千金片，株洲千金药业股份有限公司，批号：20051102。注射用环磷酰胺，江苏恒瑞医药股份有限公司，批号：06033021；伊文思兰，上海化学试剂公司，批号：F981016；冰醋酸，广东汕头市西陇化工厂0605052；印度墨汁，上海长江日用粘合材料厂，批号881120；角叉菜胶，北京西中化工厂，批号000803；戊巴比妥钠，上海化学试剂公司（进口分装），批号F20021216；大肠杆菌（CMCC44103）、金黄色葡萄球菌（CMCC26003）、乙型溶血性链球菌（CMCC32210）购自江苏省疾病控制中心。营养琼脂，北京奥博星生物技术责任有限公司，批号20040915；血琼脂基础，杭州天和微生物试剂有限公司，批号20051115。1.2药物配制取5.7 g/ml千金妇炎舒原液，加蒸馏水配成0.17，0.34，0.68 g/ml药液；取妇科千金片，去除包衣，研碎后加蒸馏水煮沸30 min，配成0.1 g/ml药液；混合菌液:取一标准环大肠杆菌（CMCC44103）及金黄色葡萄球菌（CMCC26003）分别密涂法接种于营养琼脂平板上，置37℃孵箱培养18 h；取一标准环乙型溶血性链球菌（CMCC32210）密涂法接种于血平板上，置37℃孵箱培养24 h。分别用5mlNS冲洗金黄色葡萄球菌培养板，用4ml无菌NS冲洗大肠杆菌及乙型溶血性链球菌培养板，收集并充分混匀制成细菌悬液。计数后分别以无菌NS稀释成1011个/ml。按大肠杆菌：金黄色葡萄球菌：乙型溶血型链球菌比例为2∶1∶1制备成混合细菌悬液（2×1011个/ml的细菌数），备用。1.3动物清洁级KM小鼠及SD大鼠，由河南省实验动物中心提供。1.4仪器754紫外可见分光光度计，上海光谱仪器有限公司；3111型CO2孵化箱，ThermoForma；LDZ5-2型离心机，北京医用离心机厂；PAPER-I型血小板聚集及血凝测定仪，北京世帝科学仪器公司；STEELIEX-R-80粘度计，北京世帝科学仪器公司；电子天平（FA1104N），上海精密科学仪器有限公司；JA-1203上皿电子天平，上海天平仪器厂。1.5统计方法量反应资料用t检验法；质反应资料用χ2检验法。2方法与结果2.1对混合菌液致大鼠慢性盆腔炎的治疗作用取200～220 g雌性大鼠64只，其中9只作为空白组，其余动物用40 mg/kg戊巴比妥钠腹腔麻醉后固定，常规消毒打开腹腔，找出右侧子宫，在子宫中段进4号针，划伤子宫内侧，注入混悬菌液0.1 ml。分层关闭腹腔，正常饲养。30 d后，将造模大鼠随机分为5组：每组11只，各组每日灌胃给药1次，连续28 d。模型组和正常组分别给予等体积NS。停药后次日，测定下列指标：大鼠体重；血流变；子宫和卵巢脏器系数；病理检查。结果显示，千金妇炎舒治疗组对大鼠红细胞压积与模型组比较未见明显差异；但均能降低大鼠全血及血浆黏度和血小板最大集聚率，与模型组比较差异显著（P<0.05，0.01）；6.8 g/kg组能减小子宫系数及改善模型相应部位病变程度。见表1。2.2对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响［1］取26～29 g雄性小鼠60只，随机分为5组，每组12只。各组给药1次/d，连续5 d。末次给药1 h后用二甲苯0.03 ml涂于小鼠左耳两侧。在致炎1h后处死小鼠，剪下左右两耳，用打孔器分别在同一部位取下圆耳片，称重，计算耳壳重量，并比较各组小鼠耳壳肿胀度(左耳壳重－右耳壳重)和肿胀抑制率。结果表明，千金妇炎舒治疗组均能减轻小鼠耳壳肿胀度，与空白组比较差异显著(P<0.05或P<0.01)。结果见表2。表1千金妇炎舒对大鼠血流变、脏器系数（g/100 g体重）及子宫病变程度影响（略）与空白组比较，△P<0.05，△△P＜0.01；与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。子宫炎病理学评分标准：（1）腔壁结构有无病变；(2)上皮细胞有无变性坏死；(3)慢性炎细胞浸润及其程度；(4)内膜有无充血水肿。上述病变根据由轻到重的顺序分别记为1分（轻度），2分（中度），3分（重度）。无明显病变记0分表2千金妇炎舒对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响（略）与空白组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；n=12 2.3对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响取18～22 g小鼠60只，雌雄各半，随机分为5组，每组12只。各组每日灌胃给药1次，连续5 d。末次给药1 h后，尾静脉注射0.5%Even’s blue(0.1 ml/10 g)，随即腹腔注射0.6%冰醋酸0.2 ml/只。20 min后脱颈椎处死，ip NS 5 ml冲洗，剪开腹腔，吸取洗涤液4 ml移至试管中并于2 500 r/min离心5 min，取上清液，于590 nm处测定A值。结果显示，千金妇炎舒治疗组均能减少小鼠腹腔内依文思蓝A值，与空白组比较差异极显著(P<0.01)，表明千金妇炎舒能抑制急性炎症时毛细血管通透性增加，有抗炎作用。结果见表3。表3千金妇炎舒对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响（略）与空白组比较，**P<0.01；n=12 2.4对角叉菜胶所致大鼠足肿胀的影响［2］取170～190 g雄性大鼠60只，随机分为5组，每组12只。各组每日灌胃给药1次，连续5 d。末次给药后1h，将1%角叉菜胶0.1 ml注射入右后足跖皮下，然后用容积法分别测量致炎前、致炎后1，2 h大鼠右后足踝关节以下部分容积，计算肿胀率及其抑制率。结果显示，千金妇炎舒治疗组均可减小角叉菜胶引起的大鼠足肿胀率，与空白组比较差异显著(P<0.05或P<0.01)，表明千金妇炎舒能抑制角叉菜胶致大鼠足肿胀，有抗炎作用。结果见表4。表4千金妇炎舒对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响（略）与空白组比较，*P<0.05，**P<0.01；n=10 2.5对单核-巨噬细胞功能的影响取18～21 g小鼠72只，雌雄各半，随机分为6组，每组12只。各组每日灌胃给药1次，连续7 d。并于给药第3日开始，空白组每日皮下注射灭菌NS 0.1 ml/10 g，其余各组皮下注射环磷酰胺150 mg/kg，连续5 d。末次给药后，立即尾静脉注射20%的印度墨汁0.1 ml/10 g，于2 min和10 min分别眼眶取血20μl，加入盛有2 ml 0.1%碳酸钠溶液试管中，于680 nm处测其A值。然后处死小鼠，取肝脏、脾脏称重。计算廓清指数K及吞噬指数α。K=lgOD2 min-lgOD10 mint10-t2 a=体重（g）肝脾（g）×K1/3结果显示：皮下注射环磷酰胺150 mg/kg能使小鼠廓清指数K及吞噬指数α显著下降，与空白组比较差异显著（P<0.01），而千金妇炎舒治疗组均能明显提高K和α，与模型组比较差异极显著（P<0.01），表明千金妇炎舒对环磷酰胺引起的非特异性免疫功能低下具有增强作用。见表5。表5千金妇炎舒对环磷酰胺免疫抑制小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能的影响（略）与空白组比较，△△P<0.05；与模型组比较，**P<0.01；n=12 3讨论盆腔炎系指女性子宫颈以上盆腔生殖器和盆腔腹膜及其邻近结缔组织感染引起的临床综合征［3］，为妇科较常见疑难病，其病情复杂、病程较长、病势缠绵、易反复发作，并且致病的病原体不一。中医学认为盆腔炎多由湿热淤阻、气血不畅、正气不足等原因引起，以湿、热、淤为主要致病因素。血淤是其主要病机，属于“热入血室”“带下病”及“妇人腹痛”等范畴。现代医学认为，此症由细菌感染所致，常见病原体是链球菌，金葡菌及大肠杆菌。因此，我们采用细菌性致炎、化学性烧伤致炎、非特异性炎症模型以及从免疫调节等方面观察其疗效。千金妇炎舒以活血化淤止痛为主，清热解毒消肿为佐，随证辨治，祛淤生新，散结止痛，活血解毒。根据长期临床实践及反复摸索比较，我们确定了以上实验剂量，其治疗组均优于对照组。实验结果表明，千金妇炎舒有利于改善血液流变学和促进局部的血液循环，消除炎性包块及慢性粘连，减轻子宫病变程度，调节机体的免疫功能，以使机体功能恢复正常，体现了中医整体治疗的特色。【参考文献】［1］贾丽娜，赵世平，闫静，等．妇科千金软胶囊治疗慢性盆腔炎药效学研究［J］.中药新药与临床药理，2006，17（1）：18.［2］陈奇．中药药理研究方法学［M］.北京：人民卫生出版社，1993：278，366.［3］乐杰.妇产科学，第5版［M］.北京:人民卫生出版社，2001：302。