延龄草多糖提取工艺刍议论文.doc

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延龄草多糖提取工艺刍议论文延龄草多糖提取工艺刍议论文预读:摘要:方法材料处理将延龄草放置在烘箱中60℃烘干,将其根状茎与肉质根分开,取肉质根为试验原料.将肉质根用粉碎机搅碎成粉末状态,过60目筛,保存备用.多糖含量测定2对照品溶液的配制:准确称取干燥至恒重的葡萄糖对照品10mg于100mL容量瓶中,加入蒸馏水定容至刻度,配成0.1mg/mL的葡萄糖溶液.标准曲线的绘制:准确吸取上述对照品溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL,分别置10mL具塞试管中,各加蒸馏水补至2.0mL.加入5%苯酚溶液1.0mL,摇匀,迅速精密加入浓硫酸5.0mL,摇匀,放置20min,以2.0mL水按同样显色操作作为空白,在490nm的波长处测定吸光度〔12〕.样品测定同标准曲线.提取温度对多糖得率的影响精确称取样品0.3g放置在25mL试管中,每个条件取3个平行,按料液比1∶30加水9mL,置于电热恒温水浴锅中,温度分别控制在60、70、80、90、100℃提取2h,离心分离,将上清液定容,测定吸光度值.考察提取温度对多糖得率的影响.提取时间对多糖得率的影响在试验“2.3”项所得最佳提取温度下,按料液比1∶30加水9mL,置于电热恒温水浴锅中分别提取0.5、1.5、2.0、2.5、3.5、4.5h,离心分离,将上清液定容,测定吸光度值.考察提取时间对多糖得率的影响.料液比对多糖得率的影响在试验“2.3”和“2.4”项所得的最佳条件下,分别按1∶10、1∶20、1∶30、1∶40、1∶50的比例向试管中加入水分,提取分离,将上清液定容,测定吸光度值.考察料液比对多糖得率的影响.提取次数对多糖得率的影响在上述最佳提取条件下,分别用水提取1、2、3次,提取分离,将上清液定容,测定吸光度值.考察提取次数对多糖得率的影响.正交试验设计拟采用正交试验优选提取工艺条件,根据单因素试验结果,选择提取温度、提取时间、料液比、提取次数为影响因素,进行四因素三水平的正交试验设计,结果与分析标准曲线的测定根据所测试的结果计算得出葡萄糖对照品溶液的回归方程为:y=83.360x+0.0143,r=0.9996,表明葡萄糖溶液在线性范围内与吸光度呈良好的线性关系.提取温度对延龄草多糖提取率的影响从图1可以看出,随着浸提温度的升高,多糖提取率逐渐增大,当温度达到80℃后,增幅加大,当温度上升为100℃时,多糖提取率达到最高.因此,最佳提取温度为100℃.浸提时间对延龄草多糖提取率的影响由图3可知,随着浸提时间的延长,多糖提取率呈上升趋势,当提取3.5h之后,多糖提取率处于平稳状态.由于多糖的提取时间越长,提取出的杂质也越多,选择最适提取时间为3.5h.料液比对延龄草多糖提取率的影响由图3可知,料液比在1∶10～1∶30时多糖的提取率呈平滑上升趋势,当达到1∶30时,多糖的提取率达到最大值,其后保持平稳状态.选择最适料液比为1∶30.提取次数对多糖提取率的影响由图4可知,随着提取次数的增加,多糖的提取率呈平滑上升趋势,但提取次数超过2次后多糖提取率增加缓慢,因此,选择最适提取次数为2次.3.6正交试验结果由表2可知,各因素影响延龄草肉质根多糖提取率的主次因素为:D＞B＞C＞A,即提取次数＞提取时间＞料液比＞提取温度.最佳工艺为A1B3C3D3,即提取温度80℃,提取时间4.5h,料液比1∶40,提取次数3次.由表3方差分析可知,提取温度为不显著因素,提取时间、提取次数、料液比均为显著因素,对延龄草多糖的提取率有显著影响.经验证试验,在最佳提取工艺条件下,水提法提取延龄草肉质根多糖提取率为6.75%.结论与讨论通过正交试验对延龄草肉质根多糖的提取工艺进行优化,得到的最佳提取工艺条件为:提取温度为80℃,提取时间为4.5h,料液比为1∶40,提取次数为3次.在最佳提取工艺条件下,延龄草肉质根多糖的提取率为6.75%,说明延龄草中除了主要成分皂苷类外,其多糖的含量也较高,可以作为另一种新的成分加以开发利用.