上皮性卵巢恶性肿瘤患者外周血T细胞亚群及NK细胞活性变化医学论文.doc

会员专享推荐 · 你可能也用得上更多

开通会员，畅读全站文档

本篇文档已为你保留

本篇文档价值 ~~¥35.00~~会员免费解锁

全文不限次阅读，剩余内容即刻解锁
高速下载通道，免排队、无等待
专属客服 1 对 1 答疑，优先响应
每日赠送下载券，本篇文档免费送

有 86 篇商业计划书正在上传

下载原文档

上皮性卵巢恶性肿瘤患者外周血T细胞亚群及NK细胞活性变化_医学论文【摘要】目的探讨上皮性卵巢癌患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞的活性检测的临床意义。方法采用流式细胞仪测定上皮性卵巢癌患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞的活性，以良性卵巢上皮性肿瘤及正常人作对照分析。结果上皮性卵巢癌患者外周血CD3+、CD4+、NK细胞数量及CD4+/CD8+比值较良性肿瘤组、正常对照组均明显下降(P<0.05)，而CD8+细胞水平显著升高。外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞数量的改变与上皮性卵巢癌临床病理分期有关，分期越晚，CD3+、CD4+、NK细胞数量及CD4+/CD8+细胞比值越低，CD8+细胞水平越高；Ⅰ、Ⅱ期上皮性癌患者与Ⅲ、Ⅳ期患者之间有显著差异(P<0.05)。结论检测T淋巴细胞亚群、NK细胞可用于上皮性卵巢癌患者的检测及免疫状态监测。【关键词】卵巢癌T淋巴细胞亚群NK细胞【Abstract】Objective To study on the expression and clinical significance of T lymphocyte subset and NK cell activity in the patients with epithelial ovarian carcinoma.Methods Flow cytometry was used to detect the marks of T lymphocyte subsets and NK cells in bloods amples from patients with epithelial ovarian carcinoma.Data obtained from the benign epithelial ovarian tumor and the health people were used as control.Results Lowers CD3+,CD4+T cells,NK cells and CD4+/CD8+ratio were detected in bloods amples from carcinoma group than that from the benign tumor and the health control(P<0.05).CD8+T lymphocyte were reverse.This change was related to the pathological stage.The immune function of lymphocytes in peripheral blood of the patients with epithelial ovarian carcinoma was low,and even worse in the lower grade of pathological stage.Conclusion It is valuable for estimating the function of cell immune by detecting T lymphocyte subset and NK cell.【Keywords】Ovarian Carcinoma T lymphocyte subsets NK cells卵巢恶性肿瘤是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一，而死亡率居首位。卵巢癌早期不易发现，大部分恶性肿瘤患者就诊时已错过了治疗的最佳时间。因此，如何及时发现恶性肿瘤，争取早期治疗是提高疗效，延长生存期的关键因素之一[1]。而上皮性卵巢癌占卵巢恶性肿瘤的90％。本实验旨在通过检测上皮性卵巢癌患者外周血中T细胞亚群及NK细胞的改变，对其临床意义进行探讨。1材料与方法1.1研究对象2005年9月至2007年2月住院手术治疗的原发的上皮性卵巢癌肿瘤患者为检测对象，均经病理证实。其中恶性肿瘤34例，年龄20～80岁，根据平均（48.03±11.43）岁。FIGO分期，其中Ⅰ期7例；Ⅱ期9例；Ⅲ期12例；Ⅳ期6例。良性肿瘤组30例：年龄18～75岁，平均年龄（45.23±11.32）岁，正常对照组30例，为本院健康体检者，年龄20～58岁，平均年龄（44.38±13.58）岁，所有受检对象均无免疫系统疾病或使用过免疫抑制剂。1.2试剂和仪器单克隆抗体抗CD3FITC、抗CD4PE、抗CD8PE及CD16+56PE，均由BectonDickinson公司生产，CD3+、CD4+、CD8+、CD16+56+分别代表总T、TH、TS、NK细胞。红细胞裂解液由BD公司生产。FACSCan流式细胞仪为BectonDickinson公司产品。1.3检测方法取肝素抗凝的新鲜外周血100μl，加入上述单抗20μl，混匀，室温避光20min染色；加入1.5ml红细胞裂解液，混匀后室温避光放置10min，破坏红细胞；1500r/min离心5min，弃上清；每管加入2ml 0.1%叠氮钠的磷酸盐缓冲液混匀，1000r/min离心5min，弃上清；加PBS1ml，混匀，2h内上机检测。采用FACSCan型流式细胞仪CellQuest软件获取与分析数据。以FSC H/SSC H设定淋巴细胞门，IgG/FITC/IgG2aPE确定FL1和FL2的非特异性结合水平，同时调节FSC、SSC电压，FSC阈值，FL1-FL2%、FL2-FL1%荧光补偿。每管获取1万个细胞。1.4统计学处理数据以x-±s表示，用SPSS 13.0统计软件进行统计学处理。2结果与良性肿瘤组及正常对照组相比较，卵巢癌患者CD3＋细胞、CD4＋细胞、CD4＋/CD8＋比值及NK细胞数量均显著降低(P<0.05)，而CD8＋细胞则显著升高（P<0.05），尤其是Ⅳ期患者差异更加显著（P<0.01）、Ⅰ期～Ⅳ期卵巢癌患者，CD3＋细胞、CD4＋细胞、CD4＋/CD8＋细胞比值以及NK细胞数量逐渐下降，CD8＋细胞水平逐渐升高，其中Ⅰ、Ⅱ期卵巢癌患者之间以及Ⅲ、Ⅳ期卵巢癌患者之间比较无显著差异（P>0.05），但Ⅲ、Ⅳ期卵巢癌CD3＋细胞、CD4＋细胞、CD4＋/CD8＋细胞比值及NK细胞数较Ⅰ、Ⅱ期显著下降（P<0.05），而CD8＋细胞水平显著升高（P<0.05），见表1。表1卵巢癌患者及对照组外周血T细胞亚群及NK细胞数量(％，x-±s)3讨论现代免疫学表明，机体免疫系统存在着极为复杂的调节机制，特别是在细胞免疫中，各种细胞亚群及其产物相互作用，相互调节，维持正常的免疫应答能力。癌细胞在体内的生长、扩散，直接受到宿主免疫力的制约[1]。近年研究显示，T细胞亚群，NK细胞在抗肿瘤免疫中起着非常重要的作用。CD4细胞可辅助诱导其他免疫细胞如杀伤性T细胞、B细胞、NK细胞及巨噬细胞，共同发挥抗肿瘤作用[2]。CD8则抑制上述细胞功能，此外尚有细胞毒作用。正常情况下，CD4与CD8所代表的两大类最主要的T细胞亚群处于一种动态平衡状态[3]，共同承担起维持机体正常免疫功能的作用。本实验结果显示，卵巢癌组CD4、CD4/CD8比值明显低于良性及对照组，临床Ⅲ～Ⅳ期明显低于Ⅰ～Ⅱ期，Ⅰ～Ⅱ期与对照组及良性组亦有明显差异。以上结果与文献报道结果一致[4]。这可能是由于肿瘤细胞分泌的多种免疫抑制因子所造成的。由于这种免疫抑制是肿瘤源性的，因此表现为患者的免疫状态与病情呈显著的负相关。研究表明[5]，NK细胞是在抗肿瘤早期发挥作用的效应细胞，无需预先接触抗原，无mru限制性，不依赖抗体或补体即可直接杀伤mruⅠ类分子表达低下或缺如的肿瘤细胞，是抗肿瘤的第一道防线。有研究表明，卵巢癌患者外周血NK细胞水平较正常人群低下[6,7]。本实验结果亦然，卵巢癌患者外周血中NK细胞水平较良性肿瘤组及正常对照组明显降低，且Ⅲ～Ⅳ期患者较Ⅰ～Ⅱ期患者亦有明显差异，说明NK细胞活性与病情进展亦有密切关系。通过本实验提示：（1）CD4/CD8比值在卵巢癌较早期即明显降低，是检测恶性肿瘤较灵敏指标。（2）联合检测CD4/CD8比值及NK细胞活性，对于诊断、判断病情进展有重要意义。（3）卵巢恶性肿瘤患者的细胞免疫功能低下，随病情进展免疫功能进一步削弱。参考文献[1]郎江明主编.临床免疫诊断学.广州：广东科技出版社，2003：365－368.[2]田赓，张炜阳等.CD4+CD25+调节性T细胞在上皮性卵巢癌患者外周血中的表达及临床意义.中国妇幼保健，2007，22(11):1499-1501.[3]Hernbergm M，Muhonen T，Pyrbonen S.Can the CD4+/CD8+ratio predret the outcome of interferon-alpha therapy for real cell carcinoma.Ann Onwl，1997，8（1）：71－77.[4]刘艳，朱美琪.可溶性IL-2R、IL-6及T细胞亚群测定在卵巢良性肿瘤诊断中的作用.实用肿瘤杂志，2001，16（1）42—44.[5]Zwirner NW,Fuertes MB,Girart MV,Domaica CI,et al.Cytokine-driven regulation of NK cell functions in tumor immunity:role of the MICA-NKG2D system.Cytokine Growth Factor Rev.2007 Feb-Apr，18(1-2):159-70.[6]朱丽荣，郭燕燕，曹泽毅.卵巢癌患者外周血中NK细胞和IL－2活性变化及其临床意义.癌症，1999，18（Z1）.[7]Carlsten M;Bjorkstrom NK;Norell H.DNAX accessory molecule-1 mediated recognition of freshly isolated ovarian carcinoma by resting natural killer cells.Cancer Res，2007,Feb 1，67(3):1317-25.