产淀粉酶菌种的筛选及酶活力检测.docx

会员专享推荐 · 你可能也用得上更多

开通会员，畅读全站文档

本篇文档已为你保留

本篇文档价值 ~~¥35.00~~会员免费解锁

全文不限次阅读，剩余内容即刻解锁
高速下载通道，免排队、无等待
专属客服 1 对 1 答疑，优先响应
每日赠送下载券，本篇文档免费送

有 86 篇商业计划书正在上传

下载原文档

产淀粉酶菌种的筛选及酶活力检测产胞外淀粉酶的菌株的筛选以及酶活力的测定一：实验原理异养型微生物在生存的时候，自己不能产生可以供机体使用的能源物质。所以必须从体外获取这些能源物质。某些异养型的微生物可以利用淀粉作为能源物质将其分解为葡萄糖让自己利用。但是淀粉作为大分子的物质不能直接进入微生物的体内直接将其分解。所以某些微生物会产生胞外淀粉酶，将自己周围的淀粉分解为葡萄糖。再葡萄糖进行吸收利用。本实验就是筛选出一种产胞外淀粉酶的高效菌株，并对其产生的胞外淀粉酶的酶活力进行初步检测。二：实验器材，试剂1样品：发霉的面包，富含淀粉的土壤，2仪器：离心机，试管，紫外分光光度计，三角瓶，摇床，分析天平，定量移液器，药匙，培养皿，恒温水浴锅，恒温培养箱，超净工作台，接种环，接种针，酒精灯，高压灭菌锅，直尺，移液管，洗耳球。3试剂：碘固体，DNS（3，5－二硝基水扬酸），1mg/ml的麦芽糖溶液，1%的淀粉标准溶液，PH为5.5的柠檬酸缓冲液。4培养基：淀粉培养基：可溶性淀粉2g/L，蛋白胨10g/L，牛肉膏5g/L，NaCl5g/L，琼脂20g/L，PH7.0。种子培养基：牛肉膏3g/L，蛋白胨10g/L，NaCl5g/L，pH7.0。产酶培养基：可溶性淀粉2g/L，蛋白胨10g/L，牛肉膏5g/L，氯化钠5g/L，pH7.0。三：实验步骤1：初筛①若样品为富含淀粉的土壤，则称取土壤样品10g放在盛有90ml无菌水和8颗小玻璃珠的三角瓶中，放置在摇床上震荡30min后再进行七次梯度稀释，分别取第4,5,6,7次梯度稀释后的稀释液各1ml进行初步培养。所用的培养基为淀粉培养基。在37℃恒温培养箱中培养，直至培养基中长出明显的菌落。②若样品为发霉的面包，则用接种环或接种针挑取部分的霉块。将挑取的霉块浸泡在装有10ml无菌水的试管里震荡1min进行稀释。取1ml稀释液进行初步培养。所用培养基为淀粉培养基。在37℃恒温培养箱中培养，直至培养基中长出明显的菌落。2：鉴定采用碘熏蒸法将0.04g碘轻轻洒在培养皿盖上后，将装有培养基的培养皿底部倒置在撒有碘的培养皿盖上进行碘熏1min。选透明圈直径（D）与菌落直径（d）之比最大的初选菌株。产胞外淀粉酶的菌株的筛选以及酶活力的测定一：实验原理异养型微生物在生存的时候，自己不能产生可以供机体使用的能源物质。所以必须从体外获取这些能源物质。某些异养型的微生物可以利用淀粉作为能源物质将其分解为葡萄糖让自己利用。但是淀粉作为大分子的物质不能直接进入微生物的体内直接将其分解。所以某些微生物会产生胞外淀粉酶，将自己周围的淀粉分解为葡萄糖。再葡萄糖进行吸收利用。本实验就是筛选出一种产胞外淀粉酶的高效菌株，并对其产生的胞外淀粉酶的酶活力进行初步检测。二：实验器材，试剂1样品：发霉的面包，富含淀粉的土壤，2仪器：离心机，试管，紫外分光光度计，三角瓶，摇床，分析天平，定量移液器，药匙，培养皿，恒温水浴锅，恒温培养箱，超净工作台，接种环，接种针，酒精灯，高压灭菌锅，直尺，移液管，洗耳球。3试剂：碘固体，DNS（3，5－二硝基水扬酸），1mg/ml的麦芽糖溶液，1%的淀粉标准溶液，PH为5.5的柠檬酸缓冲液。4培养基：淀粉培养基：可溶性淀粉2g/L，蛋白胨10g/L，牛肉膏5g/L，NaCl5g/L，琼脂20g/L，PH7.0。种子培养基：牛肉膏3g/L，蛋白胨10g/L，NaCl5g/L，pH7.0。产酶培养基：可溶性淀粉2g/L，蛋白胨10g/L，牛肉膏5g/L，氯化钠5g/L，pH7.0。三：实验步骤1：初筛①若样品为富含淀粉的土壤，则称取土壤样品10g放在盛有90ml无菌水和8颗小玻璃珠的三角瓶中，放置在摇床上震荡30min后再进行七次梯度稀释，分别取第4,5,6,7次梯度稀释后的稀释液各1ml进行初步培养。所用的培养基为淀粉培养基。在37℃恒温培养箱中培养，直至培养基中长出明显的菌落。②若样品为发霉的面包，则用接种环或接种针挑取部分的霉块。将挑取的霉块浸泡在装有10ml无菌水的试管里震荡1min进行稀释。取1ml稀释液进行初步培养。所用培养基为淀粉培养基。在37℃恒温培养箱中培养，直至培养基中长出明显的菌落。2：鉴定采用碘熏蒸法将0.04g碘轻轻洒在培养皿盖上后，将装有培养基的培养皿底部倒置在撒有碘的培养皿盖上进行碘熏1min。选透明圈直径（D）与菌落直径（d）之比最大的初选菌株。