生物化学实验课授课教案.docx

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生物化学实验课授课教案生物化学实验课授课教案由我整理，希望给你工作、学习、生活带来方便。《生物化学实验》教案蛋白质的呈色反应教学目的和要求1、了解构成蛋白质的基本成分及主要连接方式；2、呈色反应的基本原理；教学内容纲要1凡含有两个或两个以上肽键的物质，在碱性溶液中双缩脲与铜离子作用生成紫红色化合物2肽键的数目不同，产生双缩脲反应的颜色也不完全相同，在淡红色与紫红色之间3一切蛋白质都有双缩脲反应4凡含有游离a-氨基酸的蛋白质，胨，多肽及氨基酸（脯氨酸及羟脯氨酸除外）均可在中性溶液中与茚三酮共热呈现兰紫色反应，即茚三酮反应思考题：举例几种代表性的蛋白质呈色反应？主要参考书：陈毓荃《生物化学实验方法和技术》，科学出版社，2002赵永芳《生物化学技术原理及应用》（第三版），科学出版社，2002实验学时：学时1《生物化学实验》教案蛋白质的变性、沉淀、凝固教学目的和要求1、了解观察各种理化因素对蛋白质性质的影响2、分析和掌握变性、沉淀、凝固之间的联系和差别。教学内容纲要1、重金属盐类（铅、铜、银、汞等盐类）可与蛋白质的游离羟基生成不溶的蛋白盐沉.2、蛋白质溶液加热，增加分子碰撞，当分子动能达到凝固温度临界值时，其冲动力使键断裂破坏分子内部立体构型，而失去天然蛋白质的性质，溶解度减小，而形成不可逆的沉淀3、蛋白质水溶液中加酒精至相当浓度时，酒精使蛋白质胶体粒子脱水，从而降低蛋白质在溶液中的稳定性，而产生沉淀，若迅速加水，稀释减低酒精浓度，沉淀可复溶。但如酒精接触时间过长，引起蛋白质变性，则沉淀不能复溶。思考题：蛋白质变性的主要原因有哪些？主要参考书：陈毓荃《生物化学实验方法和技术》，科学出版社，2002赵永芳《生物化学技术原理及应用》（第三版），科学出版社，2002实验学时：学时2《生物化学实验》教案蛋白质的两性反应和等电点的测定教学目的和要求1、学习了解蛋白质两性解离性质。2、掌握测定蛋白质等电点的方法。教学内容纲要1蛋白质由氨基酸组成，虽然大多数的氨基与羧基以肽键结合，但总有一定数量自由的氨基和羧基，以及酚基、巯基、咪唑基等酸碱基团，因此蛋白质和氨基酸一样是两性解离电质。2调节溶液的PH，使蛋白质所带正负电荷数相等，净电荷为零，以兼性离子存在，此时溶液PH为蛋白质的等电点。思考题：等电点测定的方法有哪些？主要参考书：陈毓荃《生物化学实验方法和技术》，科学出版社，2002赵永芳《生物化学技术原理及应用》（第三版），科学出版社，2002实验学时：学时3《生物化学实验》教案温度、PH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响，怎样鉴定淀粉酶具有专一性教学目的和要求1、了解酶的高效性、特异性及温度、PH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响。2、了解抑制剂的特殊性质和应用等。教学内容纲要1、证明淀粉酶是具有底物特异性的酶，只能作用特异的底物---淀粉，淀粉酶活性大小可以用反应速度来表示，酶促反应速度受到多种因素的影响。2、酶活性大小可以用反应速度来表示，即在单位时间内，酶催化底物的消耗量或产物的生成量来衡量。3、反应速度达到最大值时的温度称为某种酶作用的最适温度，高于或低于此温度，均使酶的活性下降。思考题：唾液淀粉酶的作用是什么？主要参考书：陈毓荃《生物化学实验方法和技术》，科学出版社，2002赵永芳《生物化学技术原理及应用》（第三版），科学出版社，2002实验学时：4学时4《生物化学实验》教案血清中蛋白质含量的测定（一）教学目的和要求1、掌握血清蛋白质含量的双缩脲法测定的原理和方法2、了解掌握分光光度计的使用方法及检测方法。教学内容纲要1、双缩脲在碱性溶液中能与铜离子作用，生成紫红色化合物，蛋白质分子中含有许多肽键，与双缩脲类似，也能与双缩脲试剂作用，产生颜色反应，颜色的深浅与蛋白质浓度成正比。2、血清蛋白含量测定方法3、血清中蛋白测定的应用思考题：血清中含有哪些蛋白？主要参考书：陈毓荃《生物化学实验方法和技术》，科学出版社，2002赵永芳《生物化学技术原理及应用》（第三版），科学出版社，2002实验学时：2学时5《生物化学实验》教案血清中蛋白质含量的测定（二）教学目的和要求1、掌握血清蛋白质含量的考马斯亮蓝染色法的原理和方法2、了解掌握分光光度计的使用方法及检测方法。教学内容纲要1、考马斯亮蓝（Coomaie Brilliant Blue）测定蛋白含量存在着两种不同颜色形式，红色和蓝色。此染料与蛋白质结合后颜色由红色形式转变成蓝色形式，最大光吸收由465nm变成596nm。在一定蛋白质浓度范围内，蛋白质和染料结合符合比尔定律（Beer’s law），因此可以通过测定染料在595nm处光吸收的增加量得到与其结合的蛋白质量。本法测定范围为10～101μg蛋白质。2、标准曲线的绘制方法3、蛋白检测的测定精度思考题：BCA方法的基本原理？主要参考书：陈毓荃《生物化学实验方法和技术》，科学出版社，2002赵永芳《生物化学技术原理及应用》（第三版），科学出版社，2002实验学时：2学时6《生物化学实验》教案血清中葡萄糖含量测定教学目的和要求1、了解血糖的来源和去路，影响血糖的因素。2、掌握分光光度法进行血糖含量测定的标准曲线法。教学内容纲要1、葡萄糖在加热的有机酸溶液中能与某些芳香族胺类，苯胺，联苯胺，邻甲苯胺等生成有色衍生物2、利用葡萄糖在醋酸溶液中脱水后，与邻甲苯胺缩合，生成青色的Schiff碱思考题：邻甲苯胺溶液配置方法是什么？主要参考书：陈毓荃《生物化学实验方法和技术》，科学出版社，2002赵永芳《生物化学技术原理及应用》（第三版），科学出版社，2002实验学时：4学时7《生物化学实验》教案血清中胆固醇含量的测定教学目的和要求1、掌握血清中胆固醇检测的原理和方法2、了解掌握醋酸酐法和邻苯二甲醛法比色法等检测方法。教学内容纲要胆固醇的测定临床常用的比色法有两类：1、固醇化的氯仿式醋酸溶液中加入醋酸酐-硫酸试剂，产生蓝绿色。2、固醇的醋酸、乙醇式异丙醇溶液中加入高铁-硫酸试剂产生紫红色。由于胆固醇颜色反应特异性差，直接测定往往受血液中其倔因素干扰，所以精细的方法是先经抽提，分离及纯化等步骤，然后显色定量。实验采用醋酐-硫酸单一试剂显色法。本法测定101ml血清总胆固醇的正常值为125~200mg。醋酐能使胆固醇脱水，再与硫酸结合生成绿色化合物。。胆固醇及其酯在硫酸存在下与邻苯二甲醛作用，产生紫红色物质，此物质在550nm有最大吸收，可用比色法定量测定。胆固醇含量在400mg/101mL之内于吸光度呈良好的线性关系。本法优点是操作简便（无需将样品中的胆固醇抽提出来获去除样品中的蛋白质），灵敏稳定。3、蛋白检测的测定精度思考题：胆固醇可以转化为哪些生理活性物质？胆固醇合成的限速酶是什么？主要参考书：陈毓荃《生物化学实验方法和技术》，科学出版社，2002赵永芳《生物化学技术原理及应用》（第三版），科学出版社，2002实验学时：4学时生物化学实验总结生物化学实验心得高熹168615140001时间如清风般从你我指间滑过,无声无息,快得我们都不曾驻足一望,莫然回首间,一学期的生化实验已接近尾声。一学期的时间虽短，但老师的谆谆......生物化学实验大纲《生物化学》实验教学大纲课程名称：生物化学课程代码：120005课程类型：专业基础课程开课学期：第二学期课程总学时：73学时实验学时：20学时前期课程：人体解剖学、组织胚胎学、遗......生物化学生化题目：1.糖是如何分解和合成的？2.脂肪是如何分解和合成的？3.何谓三羧酸循坏？为什么说三羧酸循环是代谢的中心？4.在氨基酸生物合成中，哪些氨基酸与三羧酸循坏中间物有关？哪些氨基......生物化学《生物化学》校级精品课程建设总结报告《生物化学》是医学类各个专业和与生命学科相关的专业最重要的公共基础课，主要研究生物体内化学分子与化学反应的科学，从分子水平探讨生......生物化学实验室生物化学实验室1、基本情况生物化学实验室建于2005年9月，建筑面积194.54平方米，包括实验准备室(J-A104)、学生实验室(J-A105)、仪器室（J-A306）。为学生分组实验，教师演示实验准备......